Sanitary microbiology. Mga biochemical na katangian ng Shigella Dysentery morphology

Kasama sa genus Shigella ang higit sa 40 serotypes. Ang mga ito ay maiikling hindi kumikibo na Gram-negative rod na hindi bumubuo ng mga spores at kapsula, na tumutubo nang maayos sa ordinaryong nutrient media, hindi tumutubo sa starvation media na may citrate o malonate bilang ang tanging mapagkukunan ng carbon; hindi bumubuo ng H2S, walang urease; negatibo ang reaksyon ng Voges-Proskauer; glucose at ilang iba pang carbohydrates ay fermented upang bumuo ng acid na walang gas (maliban sa ilang biotypes ng Shigella flexneri: S. manchester at S. newcastle); bilang panuntunan, huwag mag-ferment ng lactose (maliban sa Shigella Sonne), adonite, salicin at inositol, huwag magtunaw ng gelatin, kadalasang bumubuo ng catalase, walang lysine decarboxylase at phenylalanine deaminase. Ang nilalaman ng G + C sa DNA ay 49-53 mol%. Ang Shigella ay facultative anaerobes, ang pinakamabuting kalagayan ng temperatura para sa paglago ay 37 ° C, hindi sila lumalaki sa mga temperatura sa itaas 45 ° C, ang pinakamabuting kalagayan na pH ng daluyan ay 6.7-7.2. Ang mga kolonya sa siksik na media ay bilog, matambok, translucent; sa kaso ng dissociation, ang mga magaspang na kolonya na hugis R ay nabuo. Ang paglago sa BCH sa anyo ng isang pare-parehong labo, ang mga magaspang na anyo ay bumubuo ng isang namuo. Ang mga bagong hiwalay na kultura ng Sonne Shigella ay karaniwang bumubuo ng mga kolonya ng dalawang uri: maliit na bilog na matambok (I phase), malaking flat (II phase). Ang kalikasan ng kolonya ay nakasalalay sa presensya (I phase) o kawalan (II phase) ng isang plasmid na may m. m. 120 MD, na tumutukoy din sa virulence ng Shigella Sonne.

Ang internasyonal na pag-uuri ng Shigella ay binuo na isinasaalang-alang ang kanilang mga biochemical na katangian (mannitol-non-fermenting, mannitol-fermenting, dahan-dahang lactose-fermenting Shigella) at mga tampok ng antigenic na istraktura.

Ang Shigella ay may mga O-antigen na may iba't ibang pagtitiyak: karaniwan para sa pamilyang Enterobacteriaceae, generic, species, grupo at partikular sa uri, pati na rin ang mga K-antigens; Wala silang H antigens.

Isinasaalang-alang lamang ng pag-uuri ang pangkat at partikular na uri ng O-antigens. Alinsunod sa mga character na ito, ang genus Shigella ay nahahati sa 4 na subgroup, o 4 na species, at may kasamang 44 na serotypes. Kasama sa subgroup A (Shigella dysenteriae species) ang Shigella na hindi nagbuburo ng mannitol. Kasama sa species ang 12 serotypes (1-12). Ang bawat serotype ay may sariling tiyak na uri ng antigen; Ang mga antigenic na relasyon sa pagitan ng mga serotype, pati na rin sa iba pang mga uri ng shigella, ay mahinang ipinahayag. Kasama sa subgroup B (ang species na Shigella flexneri) ang Shigella, na kadalasang nagbuburo ng mannitol. Ang Shigella ng species na ito ay serologically na nauugnay sa isa't isa: naglalaman sila ng mga antigen na partikular sa uri (I-VI), ayon sa kung saan sila ay nahahati sa mga serotypes (1-6 / "at mga antigen ng grupo, na matatagpuan sa iba't ibang mga komposisyon sa bawat serotype. at ayon sa kung aling mga serotype ay nahahati sa mga subserotype. Bilang karagdagan, ang species na ito ay may kasamang dalawang antigenic variant - X at Y, na walang mga tipikal na antigens, naiiba sila sa mga hanay ng mga antigens ng grupo.Ang S.flexneri 6 serotype ay walang subserotypes , ngunit ito ay nahahati sa 3 uri ng biochemical ayon sa mga katangian ng glucose fermentation, mannitol at dulcite .

Ang lipopolysaccharide antigen O sa lahat ng Shigella Flexner ay naglalaman ng grupong antigen 3, 4 bilang pangunahing pangunahing istraktura, ang synthesis nito ay kinokontrol ng isang chromosomal gene na naisalokal malapit sa kanyang-locus. Ang mga partikular na uri ng antigens I, II, IV, V at grupong antigens 6, 7, 8 ay resulta ng pagbabago ng antigens 3, 4 (glycosylation o acetylation) at tinutukoy ng mga gene ng kaukulang nagko-convert na mga prophage, ang lugar ng pagsasama ng na matatagpuan sa lac-pro region ng Shigella chromosome.

Lumitaw sa teritoryo ng bansa noong dekada 80. ika-20 siglo at ang bagong S.flexneri 4 (IV:7, 8) subserotype, na naging laganap, ay naiiba sa mga subserotypes 4a (IV; 3,4) at 4b (IV: 3, 4, 6), ay lumitaw mula sa S. flexneri Y (IV: 3, 4) dahil sa lysogenization ng mga nagko-convert na prophage nito IV at 7, 8.

Kasama sa subgroup C (Shigella boydix species) ang Shigella, kadalasang nagbuburo ng mannitol. Ang mga miyembro ng grupo ay serologically naiiba sa bawat isa. Ang mga antigenic na relasyon sa loob ng species ay mahinang ipinahayag. Kasama sa species ang 18 serotypes (1-18), bawat isa ay may sariling pangunahing uri ng antigen.

Kasama sa subgroup D (Shigella sonnet species) ang Shigella, na kadalasang nagbuburo ng mannitol at nagagawang mabagal (pagkatapos ng 24 na oras ng incubation at mas bago) ang lactose at sucrose. Ang mga species 5. sonnei ay may kasamang isang serotype, ngunit ang mga kolonya ng phase I at II ay may sariling mga antigen na partikular sa uri. Dalawang pamamaraan ang iminungkahi para sa intraspecific na pag-uuri ng Sonne's Shigella:

ang kanilang paghahati sa 14 na biochemical na uri at subtype ayon sa kanilang kakayahang mag-ferment ng maltose, rhamnose at xylose;

paghahati sa mga uri ng phage ayon sa sensitivity sa isang hanay ng mga kaukulang phage.

Ang mga paraan ng pag-type na ito ay pangunahing may kahalagahang epidemiological. Bilang karagdagan, sina Sonne shigella at Flexner shigella ay napapailalim sa pag-type para sa parehong layunin sa pamamagitan ng kakayahang mag-synthesize ng mga partikular na colicins (colicino-genotyping) at sa pamamagitan ng pagiging sensitibo sa mga kilalang colicins (colicinotyping). Upang matukoy ang uri ng mga colicin na ginawa ni Shigella, iminungkahi nina J. Abbot at R. Shannon ang mga hanay ng mga tipikal at tagapagpahiwatig na mga strain ng Shigella, at upang matukoy ang pagiging sensitibo ng Shigella sa mga kilalang uri ng colicins, ginagamit ang P. Frederick's Set of Reference Colicinogenic Strains. .

Ang dysentery ay isang nakakahawang sakit na nailalarawan sa pamamagitan ng pangkalahatang pagkalasing ng katawan, pagtatae at isang kakaibang sugat ng mauhog lamad ng malaking bituka. Ito ay isa sa mga madalas na talamak na sakit sa bituka sa mundo. Ang dysentery ay kilala mula pa noong sinaunang panahon sa ilalim ng pangalan ng "bloody diarrhea", ngunit ang likas na katangian nito ay naging iba. Noong 1875, ang Russian scientist na si f. A. Ibinukod ni Lesh ang amoeba Entamoeba histolytica mula sa isang pasyenteng may madugong pagtatae, sa susunod na 15 taon, naitatag ang kalayaan ng sakit na ito, na nanatili sa pangalang amoebiasis.

Ang mga causative agent ng dysentery proper ay isang malaking grupo ng mga biologically related bacteria na pinagsama sa genus Shigella. Sa unang pagkakataon pathogen ay natuklasan noong 1888 nina A. Chantemes at F. Vidal; noong 1891 ito ay inilarawan ni A. V. Grigoriev, at noong 1898 ni K. Shiga sa tulong ng natanggap Nakilala sila mula sa suwero ng pasyente pathogen sa 34 na mga pasyente na may dysentery, sa wakas ay nagpapatunay sa etiological na papel ng bacterium na ito . Gayunpaman, ang iba pang mga pathogen ay natuklasan sa mga susunod na taon. dysentery : noong 1900 - S. Flexner, noong 1915 - K. Sonne, noong 1917 - K. Stutzer at K. Schmitz, noong 1932 - J. Boyd, noong 1934 - D. Large, noong 1943 - A. Saks.

Paglaban sa Shigella

Ang Shigella ay may medyo mataas na pagtutol sa mga kadahilanan sa kapaligiran. Nakatira sila sa koton na tela at papel hanggang 0-36 araw, sa mga tuyong dumi - hanggang 4-5 na buwan, sa lupa - hanggang 3-4 na buwan, sa tubig - mula 0.5 hanggang 3 buwan, sa mga prutas at gulay - hanggang sa. hanggang 2 linggo, sa gatas at mga produkto ng pagawaan ng gatas - hanggang sa ilang linggo; sa temperatura na 60 C sila ay namamatay sa loob ng 15-20 minuto. Sensitibo sa mga solusyon sa chloramine, aktibong chlorine at iba pang mga disinfectant.

mga kadahilanan ng pathogenicity

Ang pinakamahalagang biological na ari-arian ng Shigella, na tumutukoy sa kanilang pathogenicity, ay ang kakayahang salakayin ang mga epithelial cells, dumami sa kanila at maging sanhi ng kanilang kamatayan. Ang epektong ito ay maaaring matukoy gamit ang isang keratoconjunctival test (ang pagpapakilala ng isang loop ng kultura ng Shigella (2-3 bilyong bakterya) sa ilalim ng ibabang talukap ng mata ng isang guinea pig ay nagiging sanhi ng pag-unlad ng serous-purulent keratoconjunctivitis), pati na rin sa pamamagitan ng impeksiyon ng mga kultura ng cell (cytotoxic effect) o mga embryo ng manok (ang kanilang pagkamatay), o intranasally white mice (pag-unlad ng pneumonia). Ang pangunahing pathogenicity factor ng shigella ay maaaring nahahati sa tatlong grupo:

mga kadahilanan na tumutukoy sa pakikipag-ugnayan sa epithelium ng mauhog lamad;

mga kadahilanan na nagbibigay ng paglaban sa humoral at cellular na mga mekanismo ng proteksyon ng macroorganism at ang kakayahan ng Shigella na dumami sa mga selula nito;

ang kakayahang gumawa ng mga lason at nakakalason na mga produkto na nagiging sanhi ng pag-unlad ng aktwal na proseso ng pathological.

Kasama sa unang pangkat ang mga kadahilanan ng pagdirikit at kolonisasyon: ang kanilang papel ay ginagampanan ng pili, mga protina sa panlabas na lamad, at LPS. Ang mga enzyme na sumisira sa mucus tulad ng neuraminidase, hyaluronidase, at mucinase ay nagtataguyod ng pagdirikit at kolonisasyon. Kasama sa pangalawang pangkat ang mga kadahilanan ng pagsalakay na nagtataguyod ng pagtagos ng Shigella sa mga enterocytes at ang kanilang pagpaparami sa kanila at sa mga macrophage na may sabay-sabay na pagpapakita ng isang cytotoxic at (o) enterotoxic na epekto. Ang mga katangiang ito ay kinokontrol ng mga gene ng plasmid na may m. m. 140 MD (naka-encode ito ng synthesis ng mga protina ng panlabas na lamad na nagdudulot ng pagsalakay) at ang mga chromosomal genes ng Shigella: ksr A (nagdudulot ng keratoconjunctivitis), cyt (responsable para sa pagkasira ng cell) , pati na rin ang iba pang mga gene, na hindi pa nakikilala. Ang proteksyon ng Shigella mula sa phagocytosis ay ibinibigay ng surface K-antigen, antigens 3,4 at lipopolysaccharide. Bilang karagdagan, ang Shigella endotoxin lipid A ay may immunosuppressive na epekto: pinipigilan nito ang aktibidad ng mga immune cell ng memorya.

Kasama sa ikatlong pangkat ng mga salik ng pathogenicity ang endotoxin at dalawang uri ng exotoxin na matatagpuan sa Shigella — Shiga exotoxins at Shiga-like exotoxins (SLT-I at SLT-II), na ang mga cytotoxic na katangian ay pinaka-binibigkas sa S. dysenteriael. Ang mga lason na tulad ng Shiga at Shiga ay natagpuan din sa iba pang mga serotype ng S. dysenteriae; sila ay nabuo din ng S. flexneri, S. sonnei, S. boydii, EHEC, at ilang Salmonella. Ang synthesis ng mga lason na ito ay kinokontrol ng mga tox genes ng pag-convert ng mga phage. Ang uri ng LT enterotoxins ay natagpuan sa Flexner, Sonne at Boyd Shigella. Ang synthesis ng LT sa kanila ay kinokontrol ng mga plasmid genes. Pinasisigla ng Enterotoxin ang aktibidad ng adenylate cyclase at responsable para sa pagbuo ng pagtatae. Ang Shiga toxin, o neurotoxin, ay hindi tumutugon sa adenylate cyclase system, ngunit may direktang cytotoxic effect. Ang Shiga at Shiga-like toxins (SLT-I at SLT-II) ay may m.m. 70 kDa at binubuo ng mga subunit A at B (ang huli sa 5 magkaparehong maliliit na subunit). Ang receptor para sa mga lason ay ang glycolipid ng lamad ng cell. Ang virulence ng Shigella Sonne ay nakasalalay din sa plasmid na may m. m. 120 MD. Kinokontrol nito ang synthesis ng humigit-kumulang 40 outer membrane polypeptides, pito sa mga ito ay nauugnay sa virulence. Si Shigella Sonne na may ganitong plasmid form phase I colonies at virulent. Ang mga kulturang nawalan ng plasmid ay bumubuo ng phase II na mga kolonya at kulang sa virulence. Nakikita ng mga plasmid ang m. 120-140 MD na matatagpuan sa Shigella Flexner at Boyd. Ang Shigella lipopolysaccharide ay isang makapangyarihang endotoxin.

Post-infectious immunity

Tulad ng ipinakita ng mga obserbasyon sa mga unggoy, pagkatapos magdusa ng dysentery, nananatili ang isang malakas at medyo pangmatagalang kaligtasan sa sakit. Ito ay sanhi ng antimicrobial antibodies, antitoxins, mas mataas na aktibidad ng macrophage at T-lymphocytes. Ang isang makabuluhang papel ay ginampanan ng lokal na bituka mucosa na pinagsama ng IgAs. Gayunpaman, ang kaligtasan sa sakit ay partikular sa uri sa kalikasan, ang malakas na cross-immunity ay hindi nangyayari.

Epidemiology ng dysentery

Ang pinagmulan ng impeksiyon ay lamang. Walang hayop sa kalikasan ang naghihirap mula sa dysentery. Sa ilalim ng mga pang-eksperimentong kondisyon, ang dysentery ay maaari lamang kopyahin sa mga unggoy. Ang paraan ng impeksyon ay fecal-oral. Mga paraan ng paghahatid - tubig (nangingibabaw para sa Shigella Flexner), pagkain, lalo na ang mahalagang papel ay kabilang sa gatas at mga produkto ng pagawaan ng gatas (ang nangingibabaw na ruta ng impeksiyon para sa Shigella Sonne), at pakikipag-ugnayan sa sambahayan, lalo na para sa mga species na S. dysenteriae.

Ang isang tampok ng epidemiology ng dysentery ay ang pagbabago sa komposisyon ng species ng mga pathogens, pati na rin ang Sonne biotypes at Flexner serotypes sa ilang mga rehiyon. Halimbawa, hanggang sa katapusan ng 1930s ika-20 siglo Ang S. dysenteriae 1 ay umabot ng hanggang 30-40% ng lahat ng mga kaso ng dysentery, at pagkatapos ang serotype na ito ay nagsimulang mangyari nang mas kaunti at halos nawala. Gayunpaman, noong 1960s-1980s Ang S. dysenteriae ay muling lumitaw sa makasaysayang eksena at naging sanhi ng isang serye ng mga epidemya na humantong sa pagbuo ng tatlong hyperendemic foci nito - sa Central America, Central Africa at South Asia (India, Pakistan, Bangladesh at iba pang mga bansa). Ang mga dahilan para sa pagbabago sa komposisyon ng species ng dysentery pathogens ay malamang na nauugnay sa isang pagbabago sa kolektibong kaligtasan sa sakit at sa isang pagbabago sa mga katangian ng dysentery bacteria. Sa partikular, ang pagbabalik ng S. dysenteriae 1 at ang malawak na pamamahagi nito, na naging sanhi ng pagbuo ng hyperendemic foci ng dysentery, ay nauugnay sa pagkuha ng mga plasmid nito, na nagdulot ng multidrug at pagtaas ng virulence.

Sintomas ng dysentery

Ang incubation period ng dysentery ay 2-5 araw, minsan mas mababa sa isang araw. Ang pagbuo ng isang nakakahawang pokus sa mauhog lamad ng pababang bahagi ng malaking bituka (sigmoid at tumbong), kung saan tumagos ang causative agent ng dysentery, ay cyclical: pagdirikit, kolonisasyon, ang pagpapakilala ng Shigella sa cytoplasm ng enterocytes, ang kanilang intracellular reproduction, pagkasira at pagtanggi ng mga epithelial cells, ang pagpapalabas ng mga pathogens sa lumen na bituka; pagkatapos nito, magsisimula ang susunod na cycle - pagdirikit, kolonisasyon, atbp. Ang intensity ng mga cycle ay depende sa konsentrasyon ng mga pathogens sa parietal layer ng mucous membrane. Bilang resulta ng paulit-ulit na mga pag-ikot, lumalaki ang nagpapasiklab na pokus, ang mga nagresultang mga ulser, pagkonekta, pinatataas ang pagkakalantad ng dingding ng bituka, bilang isang resulta kung saan lumilitaw ang dugo, mucopurulent lumps, at polymorphonuclear leukocytes sa mga feces. Ang mga cytotoxin (SLT-I at SLT-II) ay nagdudulot ng pagkasira ng cell, enterotoxin - pagtatae, endotoxin - pangkalahatang pagkalasing. Ang klinika ng dysentery ay higit na tinutukoy ng kung anong uri ng mga exotoxin ang ginawa sa mas malaking lawak ng pathogen, ang antas ng allergenic effect nito at ang immune status ng katawan. Gayunpaman, maraming mga isyu ng pathogenesis ng dysentery ang nananatiling hindi maipaliwanag, lalo na: ang kurso ng dysentery sa mga bata sa unang dalawang taon ng buhay, ang mga dahilan para sa paglipat ng talamak na dysentery sa talamak, ang kahalagahan ng sensitization, ang mekanismo ng lokal na kaligtasan sa sakit. ng bituka mucosa, atbp. Ang pinaka-karaniwang clinical manifestations ng dysentery ay pagtatae, madalas na pag-uudyok: sa mga malubhang kaso hanggang sa 50 o higit pang beses sa isang araw, tenesmus (masakit na spasms ng tumbong) at pangkalahatang pagkalasing. Ang likas na katangian ng dumi ay tinutukoy ng antas ng pinsala sa malaking bituka. Ang dysentery na dulot ng S. dysenteriae 1 ay pinakamalubha, ang dysentery ni Sonne ang pinakamadali.

Diagnosis ng laboratoryo ng dysentery

Ang pangunahing pamamaraan ay bacteriological. Ang materyal para sa pag-aaral ay dumi. Pathogen isolation scheme: inoculation sa Endo at Ploskirev differential diagnostic media (kaayon sa enrichment medium, na sinusundan ng inoculation sa Endo at Ploskirev media) upang ihiwalay ang mga nakahiwalay na kolonya, pagkuha ng isang purong kultura, pag-aaral ng mga biochemical na katangian nito at, isinasaalang-alang ang huli, pagkakakilanlan gamit ang polyvalent at monovalent diagnostic agglutinating sera. Ang mga sumusunod na komersyal na serum ay ginawa.

Para sa Shigella na hindi nagbuburo ng mannitol:

hanggang S. dysenteriae 1 at 2 (polyvalent at monovalent),

hanggang S. dysenteriae 3-7 (polyvalent at monovalent),

hanggang S. dysenteriae 8-12 (polyvalent at monovalent).

Sa shigella fermenting mannitol: sa mga tipikal na antigens ng S. flexneri I, II, III, IV, V, VI, sa grupo ng mga antigens ng S. flexneri 3, 4, 6,7,8 - polyvalent, sa antigens ng S. boydii 1 -18 (polyvalent at monovalent), sa antigens ng S. sonnei I phase, II phase, sa antigens ng S. flexneri I-VI + S. sonnei - polyvalent.

Para sa mabilis na pagkilala sa shigella, inirerekomenda ang sumusunod na paraan: ang isang kahina-hinalang kolonya (lactose-negative sa Endo medium) ay subcultured sa TSI (triple sugar iron) medium - three-sugar agar (glucose, lactose, sucrose) na may iron upang matukoy ang H2S produksyon; o sa isang medium na naglalaman ng glucose, lactose, sucrose, iron at urea.

Anumang organismo na nagpapababa ng urea pagkatapos ng 4-6 na oras ng pagpapapisa ng itlog ay malamang na miyembro ng genus Proteus at maaaring hindi kasama. Ang isang microorganism na gumagawa ng H,S o may urease o gumagawa ng acid sa joint (nagbuburo ng lactose o sucrose) ay maaaring hindi isama, bagama't ang mga strain na gumagawa ng H2S ay dapat imbestigahan bilang posibleng mga miyembro ng genus na Salmonella. Sa lahat ng iba pang mga kaso, ang kultura na lumago sa mga media na ito ay dapat suriin at, kung ito ay nagbuburo ng glucose (pagbabago ng kulay ng bar), ihiwalay sa purong anyo. Kasabay nito, maaari itong maimbestigahan sa agglutination test sa salamin na may naaangkop na antisera sa genus Shigella. Kung kinakailangan, ang iba pang mga biochemical na pagsusuri ay isinasagawa upang suriin na kabilang sa genus Shigella, at pag-aralan din ang kadaliang kumilos.

Ang mga sumusunod na pamamaraan ay maaaring gamitin upang makita ang mga antigen sa dugo (kabilang bilang bahagi ng CEC), ihi at dumi: RPHA, RSK, reaksyon ng coagglutination (sa ihi at dumi), IFM, RAGA (sa serum ng dugo). Ang mga pamamaraan na ito ay lubos na epektibo, tiyak at angkop para sa maagang pagsusuri.

Para sa serological diagnosis, ang mga sumusunod ay maaaring gamitin: RPGA na may kaukulang erythrocyte diagnosticums, immunofluorescent method (sa hindi direktang pagbabago), Coombs method (pagtukoy ng titer ng hindi kumpletong antibodies). Ang isang allergic test na may dysentery (isang solusyon ng mga fraction ng protina ng Shigella Flexner at Sonne) ay mayroon ding diagnostic na halaga. Ang reaksyon ay isinasaalang-alang pagkatapos ng 24 na oras. Ito ay itinuturing na positibo sa pagkakaroon ng hyperemia at infiltration na may diameter na 10-20 mm.

Paggamot ng dysentery

Ang pangunahing pansin ay binabayaran sa pagpapanumbalik ng normal na metabolismo ng tubig-asin, makatuwirang nutrisyon, detoxification, makatuwirang antibiotic therapy (isinasaalang-alang ang sensitivity ng pathogen sa antibiotics). Ang isang mahusay na epekto ay nakuha sa pamamagitan ng maagang paggamit ng isang polyvalent dysenteric bacteriophage, lalo na ang mga tablet na may pectin coating, na nagpoprotekta sa phage mula sa pagkilos ng HC1 ng gastric juice; sa maliit na bituka, ang pectin ay natutunaw, ang mga phage ay inilabas at ipinapakita ang kanilang pagkilos. Para sa mga layunin ng prophylactic, ang phage ay dapat ibigay nang hindi bababa sa isang beses bawat tatlong araw (ang panahon ng kaligtasan nito sa bituka).

Tukoy na pag-iwas sa dysentery

Upang lumikha ng artipisyal na kaligtasan sa sakit laban sa dysentery, ginamit ang iba't ibang mga bakuna: mula sa pinatay na bakterya, kemikal, alkohol, ngunit lahat ng mga ito ay naging hindi epektibo at hindi na ipinagpatuloy. Ang mga bakuna laban sa dysentery ng Flexner ay nilikha mula sa live (mutant, streptomycin-dependent) Shigella Flexner; ribosomal na mga bakuna, ngunit hindi rin ito malawakang ginagamit. Samakatuwid, ang problema ng tiyak na dysentery ay nananatiling hindi nalutas. Ang pangunahing paraan upang labanan ang dysentery ay upang mapabuti ang supply ng tubig at sistema ng alkantarilya, tiyakin ang mahigpit na sanitary at hygienic na rehimen sa mga negosyo ng pagkain, lalo na ang industriya ng pagawaan ng gatas, sa mga pasilidad ng pangangalaga sa bata, mga pampublikong lugar at sa personal na kalinisan.

Ang unang causative agent ng dysentery ay natuklasan ni A. V. Grigoriev (1891), at noong 1898 pinag-aralan at inilarawan ito ng Japanese scientist na si Shiga. Sa mga sumunod na taon, ang iba pang mga kinatawan ng genus na ito ay nahiwalay at inilarawan: Flexner (1900), Sonne (1915), Stutzer-Schmitz (1917), Large-Sachs (1934).

Ayon sa International Classification, lahat ng bacteria na nagdudulot ng dysentery ay pinagsama bilang parangal kay Shiga sa isang genus - Shigella.

Morpolohiya. Ang Shigella ay maliit (2-3 × 0.4-0.6 µm) na mga rod na may bilugan na dulo. Naiiba sila sa ibang miyembro ng pamilyang Enterobacteriaceae sa kawalan ng flagella. Wala silang mga spores o kapsula. Gram-negatibo.

paglilinang. Ang Shigella ay facultative anaerobes. Hindi mapagpanggap sa nutrient media. Dumarami sila sa MPA at MPB sa temperatura na 37 ° C at pH 7.2-7.4. Ang mga elektibo at differential diagnostic na kapaligiran para sa kanila ay Ploskirev, Endo, EMS na mga kapaligiran. Lumaki sa anyo ng maliliit, translucent, grayish, bilog na kolonya, 15-2 mm ang laki sa hugis-S. Ang isang pagbubukod ay ang Shigella ni Sonne, na kadalasang naghihiwalay, na bumubuo ng malaki, patag, maulap, hugis-R na mga kolonya na may tulis-tulis na mga gilid (Fig. 44). Sa likidong nutrient media, ang Shigella ay nagbibigay ng isang pare-parehong labo, ang mga R-form ay bumubuo ng isang namuo.

Mga katangian ng enzymatic. Ang mga katangian ng enzymatic ng Shigella ay hindi gaanong binibigkas kaysa sa iba pang mga kinatawan ng Enterobacteriaceae: sinisira nila ang mga karbohidrat nang walang pagbuo ng gas, hindi sinisira ang lactose at sucrose. Ang pagbubukod ay ang Sonne shigella, na sinisira ang mga carbohydrate na ito sa ika-2-3 araw.

Ang mga proteolytic na katangian ng Shigella ay hindi masyadong binibigkas - ang pagbuo ng indole at hydrogen sulfide ay hindi pare-pareho, sila ay nag-coagulate ng gatas, at hindi nagpapanipis ng gelatin.

Kaugnay ng mannitol, ang lahat ng shigella ay nahahati sa splitting at non-cleaving mannitol (Talahanayan 37).

Tandaan. sa - paghahati sa pagbuo ng acid.

Ang Sonne shigella ay kasalukuyang nahahati sa apat na uri ng enzymatic. Naiiba sila sa kanilang kakayahan na masira ang rhamnose at xylose (Talahanayan 38).

Tandaan. + paghahati; (+) paghahati pagkatapos ng 3-5 araw; - hindi nagbabago.

pagbuo ng lason. Ang Shigella ay mayroong endotoxin. Ang isang pagbubukod ay ang Shigella Shigi, na, bilang karagdagan sa endotoxin, ay naglalabas ng exotoxin, na may neurotoxic effect.

Antigenic na istraktura at pag-uuri. Ang Shigella ay naglalaman ng mga somatic antigens, na kinabibilangan ng mga grupo at uri ng antigens. Ayon sa International Classification, ang Shigella ay nahahati sa apat na grupo, na tinutukoy ng Latin na malalaking titik A, B, C, D.

Pangkat A S. dysenteriae: 1 - Grigorieva - Shigi; 2 - Stutzer - Schmitz; 3-7 - Malaki - Saks at 8-10 - pansamantala. Ang mga kinatawan ng pangkat na ito ay may mga tipikal na antigens lamang, na tinutukoy ng mga numerong Arabe.

Pangkat B S. flexneri. Ang mga mikrobyo ng pangkat na ito ay may mas kumplikadong antigenic na istraktura - naglalaman ang mga ito ng mga tipikal na antigen, na tinutukoy ng mga Roman numeral, at mga antigen ng grupo, na tinutukoy ng mga numerong Arabe. Ang Shigella Flexner ay may 6 na serotypes. Ang Shigella Flexner 6 ay dating itinalaga bilang isang subspecies ng S. newcastle.

Pangkat C S. boydii. Mayroon lamang mga tipikal na antigens. Mayroong 15 serological na uri sa grupong ito.

Ang Group D S. sonnei ay may sariling species na antigen (Talahanayan 39).

Sa isang microbiological na pag-aaral, ang mga sagot ay nagpapahiwatig ng serovariant at subserovariant ng nakahiwalay na kultura. Halimbawa, ang isang kultura ng Shigella Flexner 1a ay nakahiwalay.

Panlaban sa kapaligiran. Ang temperaturang 100°C ay agad na pumapatay kay Shigella. Ang temperatura na 60 ° C ay pumapatay sa kanila sa loob ng 20-30 minuto. Ang Shigella ay lumalaban sa mababang temperatura - nananatili sila sa tubig ng ilog hanggang sa 3 buwan, sa mga gulay at prutas - hanggang 10-15 buwan. Pinapatay sila ng sikat ng araw sa loob ng 2-3 oras, at Shigella Shigi - sa loob ng 20 minuto. Ang mga karaniwang ginagamit na konsentrasyon ng mga solusyon sa disinfectant ay sumisira sa kanila sa loob ng 20-30 minuto. Ang Group A na shigella ay ang pinakamababang lumalaban sa mga panlabas na salik, at ang Sonne shigella ay ang pinaka-lumalaban.

Pagiging madaling kapitan ng hayop. Ang mga hayop ay hindi sensitibo sa mga pathogen ng dysentery, maliban sa mga unggoy. Ang pang-eksperimentong impeksiyon ng mga kuneho at puting daga ay nagdudulot ng pagkalasing at kamatayan sa kanila.

Mga mapagkukunan ng impeksyon. Isang taong nagdurusa mula sa talamak at talamak na uri ng dysentery, at isang bacteriocarrier.

Mga ruta ng paghahatid. Pagkain. Ang pinakamahalaga ay ang daluyan ng tubig, gulay, prutas, iba't ibang bagay na kontaminado ng shigella, at langaw.

Pathogenesis. Sa sandaling nasa bituka na may pagkain, ang Shigella ay tumagos sa mga epithelial cell ng mauhog lamad ng malaking bituka, kung saan sila ay dumami. Ang ilan sa kanila ay namamatay. Ang endotoxin na nabuo sa panahon ng pagkasira ng bakterya ay nagpaparamdam sa mauhog na lamad, ang pagkamatagusin ng mga daluyan ng dugo ay tumataas, at ang endotoxin ay nasisipsip sa dugo, na nagiging sanhi ng pagkalasing. Ang pagkatalo ng mauhog lamad ay sinamahan ng pamamaga, nekrosis, pagdurugo. Bilang karagdagan, ang lason ay nakakaapekto sa central nervous system, na humahantong sa mga trophic disorder. Lalo na malala ang sakit na dulot ng Shigella Shigi, na tumagos nang malalim sa mauhog lamad ng colon, na nagiging sanhi ng matinding hyperemia, pamamaga at madugong pagtatae. Ang exotoxin na nabuo sa kanila ay nagdudulot ng matinding pagkalasing.

Ang magnitude ng nakakahawang dosis ay mahalaga para sa paglitaw ng sakit.

Ang kaligtasan sa sakit. Ang isang tao ay may likas na panlaban sa impeksyon sa dysentery. Pagkatapos ng sakit, ang kaligtasan sa sakit ay hindi matatag, at pagkatapos ng dysentery ni Sonne ay halos wala. Sa isang sakit na dulot ng Shigella dysentery 1 (Grigorieva - Shigi), nabuo ang isang mas matatag na antitoxic immunity.

Pag-iwas. Pangkalahatang sanitary at anti-epidemic na mga hakbang: paghihiwalay, maagang pagsusuri, pagdidisimpekta.

Tukoy na prophylaxis ay hindi nakahanap ng malawak na aplikasyon. Ang mga taong nakipag-ugnayan sa mga pasyente ay binibigyan ng polyvalent dysenteric bacteriophage.

Paggamot. Kumplikado, sulfonamides na may mga antibiotic. Walang tiyak na paggamot.

Kontrolin ang mga tanong

1. Pangalanan ang mga kinatawan ng genus Shigella - ang causative agents ng dysentery.

2. Ang kaugnayan sa aling carbohydrate ang batayan sa paghahati ng Shigella sa dalawang pangkat? Anong mga uri ng Shigella ang kasama sa bawat grupong ito?

3. Ano ang mga ruta ng pagpasok ng Shigella at anong bahagi ng bituka ang naaapektuhan nito?

4. Anong uri ng Shigella ang madalas na tumutubo sa hugis-R?

5. Aling Shigella ang may uri at pangkat na antigens?

Microbiological na pananaliksik

Ang layunin ng pag-aaral: pagtuklas at pagkilala kay Shigella para sa diagnosis; pagtuklas ng mga carrier ng bakterya; pagtuklas ng shigella sa mga pagkain.

Materyal sa pananaliksik

1. Pagdumi.

2. Sectional na materyal.

3. Mga produktong pagkain.

Mga pangunahing pamamaraan ng pananaliksik

1. Microbiological.

2. Serological.

Pag-unlad ng pananaliksik

Pangalawang araw ng pananaliksik

Ang mga seeded cup ay inalis mula sa termostat, tiningnan ng mata o sa pamamagitan ng magnifying glass. Ang mga kahina-hinalang kolonya (walang kulay) sa halagang 4-6 ay sinusuri sa medium at mannitol ni Russell. Ang paghahasik ay ginagawa sa pamamagitan ng mga stroke sa isang sloping surface at isang iniksyon sa isang agar column. Ang inoculated Russell medium ay inilalagay sa isang termostat sa loob ng 18-24 na oras (kaayon, ang reseeding mula sa selenite medium hanggang sa differential media ay tapos na).

Ikatlong araw ng pananaliksik

Alisin ang mga kulturang ginawa sa medium ni Russell mula sa thermostat. Ang mga kultura na hindi nasira ang lactose ay sumasailalim sa karagdagang pag-aaral: ang mga pahid ay ginawa, nabahiran ayon sa Gram at mikroskopiko. Sa pagkakaroon ng gram-negative rods, ang inoculation ay isinasagawa sa Hiss media, sabaw na may indicator papers (upang makita ang indole at hydrogen sulfide) at litmus milk. Ang inoculated media ay inilalagay sa isang thermostat sa loob ng 18-24 na oras.

Ikaapat na araw ng pananaliksik

Kunin ang mga pananim mula sa termostat at isaalang-alang ang resulta. Ang mga kulturang kahina-hinala para sa kanilang mga enzymatic at kultural na katangian laban sa Shigella (tingnan ang Talahanayan 37) ay napapailalim sa serological identification. Sa kawalan ng gayong mga kultura ay nagbibigay ng negatibong sagot.

Serological na pagkakakilanlan

Ang mga species, serovar, subserovar ng nakahiwalay na kultura ay tinutukoy gamit ang adsorbed sera. Ang pagtatasa ng antigenic na istraktura ay nagsisimula sa isang agglutination test sa salamin na may halo No. 1. Kasama sa halo na ito ang sera na may mga antibodies sa Sonne, Newcastle shigella at polyvalent serum sa Flexner's shigella. Sa isang positibong reaksyon ng agglutination sa pinaghalong, ang nakahiwalay na kultura ay pinagsama nang hiwalay sa bawat serum na kasama sa pinaghalong.

Ang isang positibong agglutination test na may adsorbed serum laban kay Shigella Sonne at Newcastle ay nagbibigay ng karapatang sumagot. Upang maitatag ang serovar at subserovar ng Shigella Flexner, kinakailangan na dagdagan ang magsagawa ng mga reaksiyong agglutination na may tipikal na (I, II, III, IV, V) at pangkat (1-3, 4-6-7, 8) sera. Halimbawa, ang nakahiwalay na kultura ay nagbigay ng positibong reaksyon sa uri II serum at pangkat serum 3, 4. Tulad ng makikita mula sa talahanayan, ang kultura ng Flexner Shigella, serovar 2, podserovar 1a, ay nakahiwalay. Sagot: Ang Shigella Flexner 2a ay nakahiwalay.

Sa kawalan ng agglutination na may halo No. 1, ang isang agglutination reaksyon ay ginaganap kasama ng iba pang polyvalent sera.

Kapag nagse-set up ng isang reaksyon ng agglutination, dapat isaalang-alang ng isa ang ratio ng kultura sa ilalim ng pag-aaral sa mannitol at, depende dito, gumamit ng isa o ibang suwero. Kaya't ang mga kultura na hindi sumisira ng mannitol ay sinusuri ng polyvalent sera sa Shigella dysentery Grigoriev-Shiga at Stutzer-Schmitz (1, 2), Large-Sachs (3-7), pansamantalang mga uri (8-10).

Ang mga kulturang nakakasira ng mannitol ay sinubok gamit ang Mix No. 1 at Boyd's Shigella polyvalent sera.

Sa pagkakaroon ng agglutination ng nakahiwalay na kultura ng isa sa mga sera na ito, ang isang pagsubok sa kultura ay isinasagawa sa bawat isa sa sera na kasama sa polyvalent one. Ang isang positibong resulta sa isa sa mga sera ay tumutukoy sa serovariant ng nakahiwalay na kultura.

Kapag gumagamit ng serum para sa boyd's shigella, ang agglutination ay nagsisimula sa serum ng serovar na pinakakaraniwan sa lugar. Sa ating bansa, ang shigella ni Boyd ng mga serovariant 4, 5, 7, 9 at 12 ay mas madalas na nakahiwalay (tingnan ang Fig. 44).

Bilang pinabilis na pamamaraan ng microbiological research sa dysentery, ginagamit ang fluorescent microscopy at isang biological test sa guinea pig. Sa pagpapakilala ng mga virulent strains ng Shigella sa conjunctival sac (sa ilalim ng lower eyelid), sa pagtatapos ng unang araw, ang mga hayop ay nagkakaroon ng conjunctivitis.

Kontrolin ang mga tanong

1. Anong materyal ang ginagamit para sa pagsusuri sa bacteriological sa pagsusuri ng dysentery at paano ito kinokolekta?

2. Ang pagkasira kung anong carbohydrate ang nagbibigay ng karapatang magbigay ng negatibong sagot?

3. Anong sera ang maaaring gamitin upang matukoy ang uri, subspecies, serovar at subserovar ng Shigella Flexner?

4. Anong mga serum ang kasama sa Blend #1?

Pag-aralan ang dysentery study chart sa araw.

Nutrient media

Mga Kapaligiran Ploskirev, Endo, EMS(tingnan ang kabanata 19).

Ang nilalaman ng artikulo

Shigella

Ang mga bakterya ng genus na Shigella ay ang mga sanhi ng ahente ng bacterial dysentery, o shigellosis. Ang dysentery ay isang polyetiological disease. Ito ay sanhi ng iba't ibang uri ng bacteria na pinangalanang Shigella bilang parangal kay A. Shiga. Kasalukuyan silang nakatalaga sa genus Schigella, na nahahati sa apat na species. Tatlo sa kanila - S. dysenteriae, S. flexneri at S. boydii - ay nahahati sa mga serovar, at ang S. flexneri ay nahahati pa sa mga subserovar.

Morpolohiya at pisyolohiya

Sa kanilang mga morphological na katangian, ang Shigella ay bahagyang naiiba sa Escherichia at Salmonella. Gayunpaman, kulang sila ng flagella at samakatuwid ay mga non-motile bacteria. Maraming mga strain ng Shigella ang may pili. Ang iba't ibang mga species ng Shigella ay magkapareho sa kanilang mga morphological na katangian. Ang mga causative agent ng dysentery ay chemoorganotrophs, hindi hinihingi sa nutrient media. Sa siksik na media, kapag nakahiwalay sa katawan ng pasyente, bilang panuntunan, nabuo ang mga S-form ng mga kolonya. Ang Shigella species Schigella sonnei ay bumubuo ng dalawang uri ng mga kolonya - S-(I phase) at R-form (II phase). Ang Phase I bacteria ay bumubuo ng parehong uri ng mga kolonya sa panahon ng subculturing. Ang Shigella ay hindi gaanong aktibo sa enzymatically kaysa sa iba pang enterobacteria: kapag nagbuburo ng glucose at iba pang carbohydrates, bumubuo sila ng mga acidic na produkto nang walang pagbuo ng gas. Hindi sinisira ng Shigella ang lactose at sucrose, maliban sa S. sonnei, na dahan-dahan (sa ikalawang araw) ay sinisira ang mga asukal na ito. Imposibleng makilala ang unang tatlong species sa pamamagitan ng mga biochemical na katangian.

Mga antigen

Ang Shigella, tulad ng Escherichia at Salmonella, ay may kumplikadong antigenic na istraktura. Ang kanilang mga cell wall ay naglalaman ng O-, at sa ilang mga species (Shigella Flexner) at K-antigens. Sa istrukturang kemikal, ang mga ito ay katulad ng Escherichia antigens. Ang mga pagkakaiba ay higit sa lahat sa istraktura ng mga terminal link ng LPS, na tumutukoy sa immunochemical specificity, na ginagawang posible na makilala ang mga ito mula sa iba pang enterobacteria at sa kanilang mga sarili. Bilang karagdagan, ang Shigella ay may mga antigenic cross-link na may maraming serogroup ng enteropathogenic Escherichia, na pangunahing sanhi ng mga sakit na tulad ng dysentery, at sa iba pang enterobacteria.

Pathogenicity at pathogenesis

Ang virulence ng Shigella ay tinutukoy ng kanilang mga katangian ng malagkit. Sumusunod sila sa colonic enterocytes dahil sa kanilang microcapsule. Pagkatapos ay tumagos sila sa mga enterocyte sa tulong ng mucinase, isang enzyme na sumisira sa mucin. Pagkatapos ng kolonisasyon ng mga enterocytes, ang Shigella ay pumasok sa submucosal layer, kung saan sila ay phagocytosed ng macrophage. Sa kasong ito, ang pagkamatay ng mga macrophage ay nangyayari at ang isang malaking bilang ng mga cytokine ay inilabas, na, kasama ang mga leukocytes, ay nagiging sanhi ng isang nagpapasiklab na proseso sa submucosal layer. Bilang isang resulta, ang mga intercellular contact ay nagambala at ang isang malaking bilang ng Shigella ay tumagos sa mga enterocytes na isinaaktibo ng mga ito, kung saan sila ay dumami at kumalat sa mga kalapit na selula nang hindi pumapasok sa panlabas na kapaligiran. Ito ay humahantong sa pagkasira ng epithelium ng mauhog lamad at pag-unlad ng ulcerative colitis. Ang Shigella ay gumagawa ng enterotoxin, ang mekanismo ng pagkilos nito ay katulad ng heat-labile enterotoxin ng Escherichia. Gumagawa ang Shigella Shiga ng cytotoxin na nakakaapekto sa mga enterocytes, neuron, at myocardial cells. Ipinapahiwatig nito ang pagkakaroon ng tatlong uri ng aktibidad dito - enterotoxic, neurotoxic at cytotoxic. Kasabay nito, ang pagkasira ng shigella ay naglalabas ng endotoxin - LPS ng cell wall, na pumapasok sa daluyan ng dugo at may epekto sa mga nervous at vascular system. Ang lahat ng impormasyon tungkol sa pathogenicity factor ng Shigella ay naka-encode sa isang higanteng plasmid, at ang synthesis ng Shiga toxin ay naka-encode sa isang chromosomal gene. Kaya, ang pathogenesis ng dysentery ay tinutukoy ng mga malagkit na katangian ng mga pathogens, ang kanilang pagtagos sa mga enterocytes ng colon, intracellular reproduction at produksyon ng mga toxin.

Ang kaligtasan sa sakit

Sa dysentery, bubuo ang lokal at pangkalahatang kaligtasan sa sakit. Sa lokal na kaligtasan sa sakit, ang secretory IgA (SIgA) ay mahalaga, na nabuo sa unang linggo ng sakit sa mga lymphoid cell ng bituka mucosa. Sa pamamagitan ng patong sa mucosa ng bituka, pinipigilan ng mga antibodies na ito ang Shigella mula sa paglakip at pagtagos sa mga epithelial cells. Bilang karagdagan, sa panahon ng impeksyon, ang titer ng serum antibodies IgM, IgA, IgG ay tumataas, na umaabot sa maximum sa ika-2 linggo ng sakit. Ang pinakamalaking halaga ng IgM ay matatagpuan sa unang linggo ng sakit. Ang pagkakaroon ng mga tiyak na serum antibodies ay hindi isang tagapagpahiwatig ng intensity ng lokal na kaligtasan sa sakit.

Ekolohiya at epidemiology

Ang tirahan ng Shigella ay ang malaking bituka ng tao, sa mga enterocytes kung saan sila dumami. Ang pinagmulan ng impeksyon ay mga pasyente, tao at mga carrier ng bacteria. Ang impeksyon ay nangyayari sa pamamagitan ng paglunok ng kontaminadong pagkain o tubig. Kaya, ang pangunahing ruta ng paghahatid ng impeksyon ay pagkain. Gayunpaman, inilarawan ang mga kaso ng contact-household transmission. Ang paglaban ng iba't ibang uri ng Shigella sa mga salik sa kapaligiran ay hindi pareho - ang pinakasensitibo ay S. dysenteriae, ang hindi gaanong sensitibo ay S. sonnei, lalo na sa R-form. Nananatili sila sa mga dumi ng hindi hihigit sa 6-10 na oras.

Dysentery (shigellosis)

Ang dysentery ay isang talamak o talamak na nakakahawang sakit na nailalarawan sa pamamagitan ng pagtatae, pinsala sa mauhog lamad ng colon at pagkalasing ng katawan. Isa ito sa pinakamadalas na sakit sa bituka sa mundo. Ito ay sanhi ng iba't ibang uri ng bakterya ng genus Shigella: S.dysenteriae, S.flexneri, S.boydii, S.sonnei. Sa mga taon pagkatapos ng digmaan sa mga industriyalisadong bansa, ang dysentery ay mas madalas na sanhi ng S.flexneri at S.sonne at Sa Ukraine, ginagamit nila ang internasyonal na pag-uuri ng mga bakteryang ito, na isinasaalang-alang ang kanilang mga biochemical na katangian at mga tampok ng antigenic na istraktura. Sa kabuuan, mayroong 44 Shigella serovar. Ang pangunahing paraan ng microbiological diagnosis ng dysentery ay bacteriological. Ang pamamaraan ng paghihiwalay ng pathogen ay klasikal: inoculation ng materyal sa enrichment medium at Ploskirev's agar, pagkuha ng isang purong kultura, pag-aaral ng mga biochemical na katangian nito at pagkakakilanlan gamit ang polyvalent at monovalent agglutinating sera.

Pagkuha ng materyal para sa pananaliksik

Ang isang positibong resulta ng microbiological analysis ay higit sa lahat ay nakasalalay sa napapanahon at tamang sampling ng materyal na pagsubok. Sa mga kabayo at bakterya, madalas silang dumi, mas madalas - pagsusuka at paghuhugas ng tiyan at bituka. Ang mga dumi (1-2 g) ay kinukuha gamit ang isang glass rod mula sa isang sisidlan o lampin, kabilang ang mga piraso ng mucus at nana (ngunit hindi dugo). Pinakamainam na kumuha ng mucus (pus) mula sa mga sugat ng mucous membrane para sa pananaliksik sa panahon ng colonoscopy. Kapag nangongolekta at naghahasik ng materyal, mahalaga na mahigpit na sumunod sa ilang mga patakaran.Kung maaari, ang bacteriological research ay dapat magsimula bago magsimula ang etiotropic na paggamot. Ang mga pinggan bago kumuha ng mga dumi (mga sisidlan, kaldero, garapon) ay pinapaso ng tubig na kumukulo at sa anumang kaso ay hindi ginagamot ng mga solusyon sa disinfectant. Napakasensitibo ng Shigella. Ang materyal sa pagsubok ay dapat na mabilis (sa gilid ng kama) na nahasik sa daluyan ng pagpapayaman at kahanay sa pumipili na agar sa isang Petri dish. Maaari kang dumi nang hindi naghihintay ng pagdumi, gamit ang cotton swab o cyman's rectal tubes. Ang materyal na kinuha o inoculated media ay dapat na maihatid kaagad sa laboratoryo. Kung imposibleng maghasik sa ospital at mabilis na maihatid, ang mga dumi ay pinananatili sa isang pang-imbak (30% glycerol + 70% phosphate buffer) sa 4-6 ° C nang hindi hihigit sa isang araw. Ang mga pathogen ng dysentery ay napakabihirang tumagos sa dugo at ihi, at samakatuwid ang mga bagay na ito ay karaniwang hindi naghahasik. Ang bacteriaological analysis ng sectional material ay dapat isagawa sa lalong madaling panahon pagkatapos ng kamatayan (malaking bituka, mesenteric lymph nodes, mga piraso ng parenchymal organs). Sa panahon ng paglaganap ng dysentery, sinusuri din ang mga produktong pagkain, lalo na ang gatas, keso, at kulay-gatas.

Pananaliksik sa bakterya

Ang mga feces ay inoculated sa parallel sa pumipili na daluyan ng Ploskirev upang makakuha ng mga nakahiwalay na kolonya at kinakailangan sa selenite na sabaw upang maipon ang Shigella, kung kakaunti ang mga ito sa materyal na pagsubok. Ang mga mucopurulent na piraso ay pinili gamit ang isang bacteriological loop, banlawan nang lubusan sa 2-3 test tubes na may isotonic sodium chloride solution, na inilapat sa daluyan ng Ploskirev at ipinahid sa agar na may glass spatula sa isang maliit na lugar. Pagkatapos ay aalisin ang spatula mula sa daluyan at ang natitirang materyal ay ipapahid dito sa natitirang bahagi ng uninoculated na ibabaw. Kapag naghahasik sa 2-3 tasa, isang bagong bahagi ng buto ang inilalapat sa bawat isa sa kanila. Ang mga piraso ng uhog at nana ay inihahasik sa sabaw ng selenite nang hindi binabalaan. Ang mga di-emulsified na dumi ay inihahasik sa selenite broth sa isang ratio na 1:5. Kapag naghahasik ng suka at paghuhugas, ginagamit ang selenite broth ng dobleng konsentrasyon at ang ratio ng buto sa daluyan ay 1:1. Inihasik sa gilid ng kama ng pasyente, ang nutrient media ay direktang inilalagay sa isang thermostat. Ang lahat ng mga pananim ay lumago sa 37 ° C sa loob ng 18-20 na oras. Sa ikalawang araw, sa mata o may 5x-10x magnifying glass, ang pattern ng paglago ay sinusuri sa daluyan ng Ploskirev, kung saan ang shigella ay bumubuo ng maliliit, transparent, walang kulay na mga haligi . Si Shigella Sonne ay maaaring magbigay ng mga haligi ng dalawang uri: ang isa ay patag na may tulis-tulis na mga gilid, ang isa ay bilog, matambok, na may basang ningning. Ang 3-4 na mga kolonya ay sinusuri nang mikroskopiko hanggang sa sila ay ganap na bulok at na-subculture sa puso ni Olkenitsky upang ihiwalay ang isang purong kultura. Kung walang paglaki sa Ploskirev's agar, o walang katangian na mga kolonya ng Shigella, ang pagtatanim mula sa selenite broth ay ginagawa sa Ploskirev's o Endo agar. Sa isang sapat na bilang ng mga tipikal na kolonya, ang isang tinatayang reaksyon ng agglutination ay inilalagay sa baso na may pinaghalong Flexner at Sonne sera. Sa ikatlong araw, ang likas na katangian ng paglago sa medium ng Olkenitsky ay isinasaalang-alang. Ang mga Schiegel ay nagdudulot ng mga pagbabago sa katangian sa trisucre agar (ang haligi ay nagiging dilaw, ang kulay ng beveled na butil ay hindi nagbabago, walang pag-itim). Ang isang kahina-hinalang kultura ay inihasik sa Hiss medium upang matukoy ang mga biochemical na katangian, o ang mga enterotest ay ginagamit. Ang serological na pagkakakilanlan ng mga nakahiwalay na kultura ay isinasagawa gamit ang isang agglutination test sa salamin, una na may pinaghalong sera laban sa Flexner at Sonne species, na madalas na matatagpuan, at pagkatapos ay may monovidovima at monoreceptor sera. Kamakailan, parehong polyvalent at monovalent commercial sera ay ginawa laban sa lahat ng uri ng dysentery pathogens. Upang matukoy ang uri ng Shigella, ginagamit din ang isang reaksyon ng coagglutination. Ang uri ng pathogen ay natutukoy sa pamamagitan ng isang positibong reaksyon sa protina A ng Staphylococcus aureus, kung saan ang mga partikular na antibodies laban sa Shigella ay adsorbed. Ang isang patak ng antibody-sensitized protein A ay inilapat sa isang tipikal na kolonya, ang ulam ay inalog, at pagkatapos ng 15 minuto, ang hitsura ng agglutinate ay sinusunod sa ilalim ng mikroskopyo. Ang reaksyon ng coagglutination ay maaaring itakda na sa ikalawang araw ng pag-aaral, kung mayroong sapat na bilang ng mga lactose-negative na kolonya sa medium. Upang mabilis at mapagkakatiwalaang makilala ang Shigella, ang direkta at hindi direktang immunofluorescence at enzymatic antibodies na mga pagsusuri ay isinasagawa din . Ang huli ay lubos na tiyak sa dysentery at lalong ginagamit sa pagsusuri sa laboratoryo ng sakit. Upang makita ang mga antigen sa dugo ng mga pasyente, kabilang ang mga nasa nagpapalipat-lipat na mga immune complex, ang aggregate-hemagglutination reaction at ang ELISA method (diagnostic test system "Shigelaplast ") ay maaaring gamitin. Ang mga antigen ng Shigella sa mga dumi at ihi ay nakikita gamit ang RNGA, RSK at coagglutination. Ang mga pamamaraang ito ay lubos na epektibo, tiyak at angkop para sa maagang pagsusuri. Upang maitatag ang kaugnayan ng mga nakahiwalay na kultura sa genus Shigella, naglalagay din sila ng isang keratoconshiiktivauin na pagsubok sa mga baboy na Guinea. Ang isang loop ng agar culture o isang patak ng sabaw ay ipinapasok sa conjunctival sac. Mahalagang huwag masaktan ang kornea. Svizhovidileni shigella sanhi binibigkas keratitis sa ika-2-5 araw pagkatapos ng pagpapakilala ng kultura. Ang salmonella ay maaari ding maging sanhi ng conjunctivitis, ngunit hindi ito nakakaapekto sa kornea. Gayunpaman, dapat tandaan na ang enteroinvasive Escherichia coli (EIEC), lalo na ang mga serovar 028, 029,0124,0143, atbp., ay nagdudulot din ng eksperimentong keratoconjunctivitis sa mga guinea pig. Ang pamamaraang bacteriological para sa pag-diagnose ng dysentery ay maaasahan, ngunit sa iba't ibang mga laboratoryo (depende sa sa mga kwalipikasyon ng mga bacteriologist at mga katulong sa laboratoryo) nagbibigay lamang ito ng 50-70% ng mga positibong resulta. Bilang karagdagan sa pag-diagnose ng mga sakit, ang bacteriological research ay isinasagawa din upang makilala ang mga carrier ng bakterya, lalo na sa mga empleyado ng mga negosyo ng pagkain, mga institusyon ng mga bata at mga institusyong medikal. Upang maitaguyod ang mga pinagmumulan ng impeksyon, ang mga fagovar at colicinovar ng Shigella ay tinutukoy.

Serological diagnosis

Ang serologic diagnosis ng dysentery ay bihira. Ang nakakahawang proseso ay hindi sinamahan ng makabuluhang antigenic irritation, samakatuwid, ang antibody titers sa serum ng mga pasyente at convalescents ay mababa. sila ay matatagpuan sa ika-5-8 araw ng sakit. Mas maraming antibodies ang nabuo sa ika-2-3 linggo. Ang volumetric agglutination reaction na may microbial diagnosticums ay nakatakda sa parehong paraan tulad ng Vidal reaction sa typhoid fever at paratyphoid fever. Ang serum ng dugo ay natunaw mula 1:50 hanggang 1:800. Ang diagnostic titer ng antibodies sa S.flexneri sa mga pasyenteng nasa hustong gulang ay 1:200, sa S.dysenteriae at S.sonnei - 1:100 (sa mga bata, ayon sa pagkakabanggit - 1:100 at 1:50) gamit ang paired sera method. Ang pagtaas ng titer ng 4 o higit pang beses ay may diagnostic value. Ang mga erythrocyte diagnosticum ay pangunahing ginawa mula sa mga antigens ng S.flexneri at S.sonnei. Ang setting ng isang allergic intradermal test na may Zuverkalov's dysentery (isang solusyon ng mga fraction ng protina ng Shigella Flexner at Sonne) ay pangalawang kahalagahan din para sa diagnosis. Nagiging positibo ito sa mga pasyente na may dysentery, simula sa ika-4 na araw. Ang accounting para sa reaksyon ay isinasagawa pagkatapos ng 24 na oras. Sa paglitaw ng hyperemia at edema ng balat na may diameter na 35 mm o higit pa, ang reaksyon ay tinasa bilang malakas na positibo, sa 20-34 mm ito ay katamtaman, at sa 10-15 mm ito ay nagdududa.

Tukoy na pag-iwas at paggamot

Ang pagkuha ng iba't ibang mga bakuna (pinainit, pormal, kemikal) ay hindi nakalutas sa problema ng tiyak na pag-iwas sa dysentery, dahil lahat ng mga ito ay may mababang kahusayan. Para sa paggamot, ginagamit ang mga fluoroquinolones at, hindi gaanong karaniwan, mga antibiotic.

Genus Escherichia.

Ang Escherichia ay ang pinakakaraniwang aerobic intestinal bacteria na, sa ilalim ng ilang partikular na kundisyon, ay maaaring magdulot ng malawak na grupo ng mga sakit ng tao, parehong bituka (diarrhea) at extraintestinal (bacteremia, urinary tract infections, atbp.) localization. Ang pangunahing species - E. coli (E. coli) - ang pinakakaraniwang sanhi ng ahente ng mga nakakahawang sakit na dulot ng enterobacteria. Ang pathogen na ito ay isang indicator ng fecal contamination, lalo na ang tubig. Ang if - titer at if - index ay kadalasang ginagamit bilang sanitary indicator. Ang Escherichia ay bahagi ng microflora ng malaking bituka ng mga mammal, ibon, reptilya at isda.

mga katangiang pangkultura. Sa likidong media, ang E. coli ay nagbibigay ng diffuse turbidity, sa siksik na media ito ay bumubuo ng S- at R-form ng mga kolonya. Sa Endo medium para sa Escherichia, ang lactose-fermenting Escherichia coli ay bumubuo ng matinding pulang kolonya na may metal na kinang, non-fermenting - maputlang rosas o walang kulay na mga kolonya na may mas madilim na sentro, sa Ploskirev's medium - pula na may madilaw-dilaw na tint, sa Levin's medium - madilim. asul na may metal na kinang.

mga katangian ng biochemical. Escherichia coli sa karamihan ng mga kaso ferments carbohydrates (glucose, lactose, mannitol, arabinose, galactose, atbp.) Sa pagbuo ng acid at gas, form indole, ngunit hindi bumubuo ng hydrogen sulfide, at hindi tunawin gelatin.

Antigenic na istraktura. Walang nakitang makabuluhang pagkakaiba sa morphological sa pagitan ng pathogenic at non-pathogenic na Escherichia coli. Ang kanilang pagkakaiba ay batay sa pag-aaral ng mga katangian ng antigenic. Kabilang sa mga surface antigen ang polysaccharide O antigens, flagellar H antigens, at capsular polysaccharide K antigens. Mahigit sa 170 variant ng O-antigens ang kilala (ito ay tumutugma sa pag-aari ng pathogen sa isang tiyak na serogroup) at 57 - H- antigens (na kabilang sa serovar). Bahagi diarrheagenic(nagdudulot ng pagtatae) Kasama sa Escherichia coli ang 43 O-group at 57 OH-variant.

Ang pangunahing pathogenicity kadahilanan ng pagtatae E.coli.



1. Mga salik ng pagdirikit, kolonisasyon at pagsalakay na nauugnay sa pili, mga istruktura ng fimbrial, mga protina ng panlabas na lamad. Ang mga ito ay naka-encode ng plasmid genes at nagtataguyod ng kolonisasyon ng mas mababang maliit na bituka.

2. Exotoxins: cytotonins (pasiglahin ang hypersecretion ng fluid ng mga selula ng bituka, nakakagambala sa metabolismo ng tubig-asin at nag-aambag sa pagbuo ng pagtatae) at enterocytotoxins (kumilos sa mga selula ng dingding ng bituka at capillary endothelium).

3. Endotoxin (lipopolysaccharide).

Depende sa pagkakaroon ng iba't ibang mga kadahilanan ng pathogenicity, ang diarrheagenic Escherichia coli ay nahahati sa limang pangunahing uri: enterotoxigenic, enteroinvasive, enteropathogenic, enterohemorrhagic, enteroadhesive.

4. Pathogenic E. coli ay nailalarawan sa pamamagitan ng paggawa ng mga bacteriocins (colicins).

Enterotoxigenic E. coli may mataas na molecular weight na thermolabile na lason, katulad ng pagkilos sa cholera, nagiging sanhi ng pagtatae na tulad ng kolera (gastroenteritis sa mga bata, pagtatae ng manlalakbay, atbp.).

Enteroinvasive Escherichia coli kayang tumagos at dumami sa mga selula ng epithelium ng bituka. Nagdudulot sila ng labis na pagtatae na may pinaghalong dugo at isang malaking bilang ng mga leukocytes (isang tagapagpahiwatig ng isang invasive na proseso) sa mga dumi. Klinikal na kahawig ng dysentery. Ang mga strain ay may ilang pagkakatulad sa Shigella (non-motile, hindi nagbuburo ng lactose, may mataas na enteroinvasive properties).

Enteropathogenic E.coli- ang pangunahing sanhi ng mga ahente ng pagtatae sa mga bata. Sa gitna ng mga sugat ay ang pagdirikit ng bakterya sa epithelium ng bituka na may pinsala sa microvilli. Nailalarawan ng matubig na pagtatae at matinding pag-aalis ng tubig.

Enterohemorrhagic Escherichia coli maging sanhi ng pagtatae na may halong dugo (hemorrhagic colitis), hemolytic-uremic syndrome (hemolytic anemia kasabay ng renal failure). Ang pinakakaraniwang serotype ng enterohemorrhagic Escherichia coli ay O157:H7.

Enteroadhesive E.coli hindi bumubuo ng mga cytotoxin, hindi gaanong pinag-aralan.

Epidemiology. Ang pangunahing mekanismo ng pagkalat ng diarrheal E. coli ay fecal-oral. Maaaring mangyari ang impeksyon sa pamamagitan ng pagkain, tubig, habang nag-aalaga ng mga hayop. Dahil ang Escherichia ay naninirahan sa bituka ng maraming uri ng hayop, mahirap matukoy ang tiyak na pinagmulan ng impeksiyon. Ang ruta ng pakikipag-ugnay ng impeksyon ay maaaring nasa mga saradong institusyon. Ang enteropathogenic at enteroinvasive E. coli ay ang pinakakaraniwang sanhi ng nosocomial outbreaks ng escherichiosis.

Mga diagnostic sa laboratoryo. Ang pangunahing diskarte ay ang paghihiwalay ng isang purong kultura sa differential diagnostic media at ang pagkakakilanlan nito sa pamamagitan ng antigenic properties. Inilagay nila ang RA na may isang hanay ng polyvalent OK (sa O- at K-antigens) sera, pagkatapos - adsorbed O-sera at mga kultura na pinainit sa 100 degrees Celsius (upang sirain ang K-antigens).

Ang biochemical differentiation ay may karagdagang kahalagahan. Ang pagkilala sa mga uri ng diarrheagenic ay posible sa pamamagitan ng pagtukoy ng mga partikular na marker (enterohemorrhagic Escherichia coli ay hindi nagbuburo ng sorbitol, at ang serovar O157: H7 ay hindi nagpapakita ng aktibidad ng beta-glucuronidase).

Genus Shigella.

Ang Shigella ay mga pathogen sa bituka ng mga tao at primates na nagdudulot ng bacillary dysentery o shigellosis. Alinsunod sa antigenic na istraktura ng O-antigen at biochemical properties, ang mga kilalang Shigella serotypes ay nahahati sa apat na species o serogroups - S.dysenteriae (serogroup A), S.flexneri (serogroup B), S.boydii (serogroup C) at S.sonnei (serogroup D).

Sa pamamagitan ng mga tampok na morphological Ang Shigella ay hindi naiiba sa ibang enterobacteria. Ang mga ito ay non-stable facultative - anaerobic gram-negative rods.

mga katangian ng biochemical. Ang Shigella ay hindi aktibo sa biochemically kumpara sa iba pang bacteria sa bituka. Hindi sila bumubuo ng hydrogen sulfide sa three-sugar-iron agar, huwag mag-ferment ng urea.

Ang mga strain ng S.dysenteriae (serogroup A) na nag-ferment lamang ng glucose na walang gas formation ay may pinakamababang aktibidad ng enzymatic; hindi tulad ng ibang shigellas, ang species na ito ay mannitol-negative.

Shigella Flexner ferment mannitol, bumubuo ng indole, ngunit huwag mag-ferment ng lactose, dulcit at xylose. Ang Newcastle serotype ay nahahati sa tatlong uri ng biochemical. Para kay Shigella Flexner, ang paraan ng paghahatid ng tubig ay higit na katangian.

Ang Boyd's Shigella (serogroup C) ay may katulad na biochemical activity, ngunit nag-ferment ng dulcite, xylose at arabinose. Mayroon silang isang bilang ng mga serotype, na ang bawat isa ay may sariling pangunahing uri ng antigen.

Si Shigella Sonne (serogroup D) ay may kakayahang dahan-dahang mag-ferment ng lactose at sucrose, may mga biochemical na uri at uri ng phage. Ang pangunahing ruta ng paghahatid ay pagkain (mas madalas sa pamamagitan ng gatas at mga produkto ng pagawaan ng gatas).

Antigenic na istraktura. Ang Shigella ay mayroong O- at K-antigens. Ang mga O-antigen ay may mga epitope na may iba't ibang partikularidad - mula sa mga karaniwan sa pamilyang Enterobacteriaceae hanggang sa mga partikular sa uri. Isinasaalang-alang lamang ng pag-uuri ang thermostable na grupo (apat na grupo o species - A, B, C at D) at partikular sa uri (dibisyon sa mga serotype). Kasama sa mga Thermolabile antigens ang K-antigens (naroroon sila sa mga grupo A at C) at fimbrial antigens (sa Shigella Flexner ang mga ito ay antigenically katulad ng E. coli). Ang pagpapasiya ng antigenic na istraktura ay kinakailangan para sa pangwakas na pagkakakilanlan.

Epidemiology. Ang Shigella ay medyo matatag sa panlabas na kapaligiran. Ang pinagmulan ng impeksiyon ay isang tao na may iba't ibang anyo ng mga klinikal na pagpapakita ng shigellosis. Ang mekanismo ng impeksyon ay fecal-oral. Para sa iba't ibang uri ng shigella, ang mga pangunahing ruta ng paghahatid ay katangian (contact-household - para sa S.dysenteriae, pagkain - para sa S.sonnei, tubig - para sa S.flexneri). Ang proseso ng epidemya ay nailalarawan sa pamamagitan ng isang pagbabago sa istraktura ng nagpapalipat-lipat na mga populasyon ng mga pathogen - isang pagbabago sa nangungunang species, biovars, serovars, na nauugnay sa parehong mga pagbabago sa kaligtasan sa sakit ng populasyon at mga pagbabago sa mga katangian ng pathogen, lalo na sa pagkuha. ng iba't ibang plasmids (R, F, Col, atbp.). Ang nakakahawang dosis ay humigit-kumulang 200 - 300 shigella. Ang mas banayad na kurso ay may dysentery na dulot ng shigella ni Sonne.

Mga kadahilanan ng pathogenicity at pathogenesis ng mga sugat. Ang pangunahing biological na katangian ng Shigella ay ang kakayahang salakayin ang mga epithelial cells, dumami sa kanila at maging sanhi ng kanilang kamatayan. Ang pagbuo ng isang pokus sa mucosa ng pababang colon (sigmoid at tumbong) ay paikot: pagdirikit, kolonisasyon, pagpapakilala ng shigella sa cytoplasm ng enterocytes, pagpaparami, pagkasira at pagtanggi ng mga epithelial cells, ang paglabas ng shigella sa bituka. lumen, pagdirikit muli, atbp.

Tungkulin mga kadahilanan ng pagdirikit at kolonisasyon magsagawa ng pili, panlabas na lamad protina, LPS, enzymes - neuraminidase, mucinase, hyaluronidase (sirain ang mucus).

May iba't ibang uri ang Shigella mga kadahilanan ng pagsalakay at paglaban sa pagkilos ng mga mekanismo ng pagtatanggol (K-antigen, LPS, atbp.) na kinokontrol ng Shigella chromosomal genes at plasmids.

Iba ang Shigella lason. Mayroon silang endotoxin at Shiga-like cytotoxins (SLT-1, SLT-2). Ang mga cytotoxin ay nagdudulot ng pagkasira ng cell, enterotoxin - pagtatae, endotoxin - pangkalahatang pagkalasing. Shiga lason nagiging sanhi ng paglabag sa synthesis ng protina, ang pagsipsip ng mga sodium at water ions, ang pag-agos ng likido sa pokus ng pamamaga.

Ang pinakakaraniwang sintomas ng dysentery ay pagtatae, tenesmus(masakit na spasms ng tumbong) at madalas na pag-uudyok, pangkalahatang pagkalasing. Ang likas na katangian ng dumi ay tinutukoy ng antas ng pinsala sa malaking bituka.

Post-infectious immunity- matibay, partikular sa uri.

Mga diagnostic sa laboratoryo. Ang pangunahing pamamaraan ng diagnostic ay bacteriological. Ang mga dumi ay inoculated sa Endo at Ploskirev differential diagnostic media upang makakuha ng mga nakahiwalay na kolonya. Ang mga purong kultura ay pinag-aralan ng mga biochemical na katangian, ang pagkilala ay isinasagawa sa RA na may poly- at monovalent sera. Kung ang nakahiwalay na kultura ay may mga biochemical na katangian ng Shigella, ngunit hindi nagsasama-sama ng serum sa O-antigens, dapat itong pakuluan ng 30 minuto upang sirain ang heat-labile na K-antigens, na kadalasang pumipigil sa agglutination ng Shigella serogroups A at C (i.e. ang mga na may K-antigens), at muling galugarin sa RA.

Para sa serological diagnosis, ginagamit ang RPHA na may group erythrocyte diagnosticums.

Lektura bilang 8. Mga kinatawan ng genera Vibrio, Campylobacter, Helicobacter.

Genus Vibrio.

Kasama sa pamilyang Vibrionaceae ang motile, curved, rod-shaped bacteria na may polar flagella. Evolutionarily nagmula sa aquatic bacteria, ay malawak na ipinamamahagi sa sariwang at tubig dagat, sa invertebrates at vertebrate host. Ang mga species na pathogenic sa mga tao ay inuri sa genera Vibrio, Aeromonas At Plesiomonas.

Ang genus Vibrio ay nailalarawan sa pamamagitan ng maikling tuwid o curved gram-negative rods, mobile, hindi bumubuo ng mga spores at kapsula, lumalaki nang maayos sa ordinaryong media. Nag-ferment sila ng mga karbohidrat na may pagbuo ng acid na walang gas, sensitibo sila sa vibriostatics O / 129. Maaaring nilinang sa isang temperatura ng plus 18 hanggang 37 tungkol sa C, pH 8.6-9.0.

Ang mga kinatawan ng genus Vibrio ay naiba mula sa ibang genera ng pamilya sa pamamagitan ng mga biochemical test. Kasama sa genus ang higit sa 25 species, kung saan ang pangunahing halaga ay Vibrio cholerae- ang causative agent ng cholera, pati na rin ang V.parahaemolyticum, V.vulnificus.

Vibrio cholerae.

Morpolohiya. Ang Vibrio cholerae ay may isang polar flagellum, kadalasang kahawig ng kuwit ( kuwit ni Koch). Ang isang mahalagang diagnostic sign ay ang kadaliang mapakilos (tinutukoy sa pamamagitan ng microscopy gamit ang hanging o crushed drop method). Morphologically variable. Mabahiran ang mga ito ng tubig na Pffeifer fuchsin at Ziehl carbol fuchsin.

mga katangiang pangkultura. Facultative anaerobe. Ang Vibrio cholerae ay hindi mapagpanggap sa nutrient media. Mahusay itong dumami sa 1% alkaline (pH 8.6-9.0) na tubig na peptone, nangunguna sa bakterya ng pangkat ng bituka (enrichment medium), ay bumubuo ng isang pinong mala-bughaw na pelikula at labo. Upang sugpuin ang paglaki ng Proteus at ilang iba pang mga microorganism, ang peptone na tubig na may karagdagan ng potassium tellurite ay ginagamit.

Sa siksik na media, ang Vibrio cholerae ay bumubuo ng makinis, vitreous, transparent na may maasul na kulay, mga kolonya na hugis disc na may malapot na pagkakapare-pareho. Alkaline agar, bile salt agar, alkaline blood agar ay ginagamit, ang pinakamahusay ay TCBS - agar (agar na may thiosulfate, citrate, bile salts at sucrose).

mga katangian ng biochemical. Ang Vibrio cholerae ay nagbuburo ng maraming carbohydrates (glucose, sucrose, mannose, mannitol, lactose, levulose, glycogen, starch) na may pagbuo ng acid na walang gas. Kaugnay ng tatlong asukal ( Triad ni Heiberg) - sucrose, mannose at arabinose, ang mga vibrios ay nahahati sa walong biochemical na grupo, ang vibrio cholerae ay kabilang sa unang grupo (nabubulok ang sucrose at mannose).

Ang Vibrio cholerae ay nabubulok ang gelatin, kasein, nag-coagulate ng gatas at nabubulok ang mga paghahanda ng protina sa indole at ammonia.

View V.cholerae ay nahahati sa biotypes, serogroups At mga serovar.. Ang mga pangunahing biotype ay klasiko (V.cholerae asiaticae) at El Tor (V.cholerae eltor). Ang mga serogroup ay nakikilala ayon sa istraktura ng O-antigens, sa pangunahing pangkat ng O1 ng Vibrio cholerae, ang mga serovars Ogawa, Inaba at Hikojima ay nakikilala.

Antigenic na istraktura. Ang Vibrio cholerae ay gumagawa ng mga thermostable na O-antigen at mga thermolabile na H-antigen. Ayon sa istraktura ng O-antigens, 139 na mga serogroup ang nakilala, ang mga biotype ng El Tor at klasiko ay pinagsama sa pangkat 01 (na-type sa 01 - antiserum). Isolates ng El - Tor naiiba sa hemolytic properties (sanhi ng hemolysis ng tupa erythrocytes), ang kakayahan upang agglutinate manok erythrocytes, paglaban sa polymyxin, sensitivity sa phages.

Ang O-antigen ng pangkat 01 ay heterogenous at may kasamang isang karaniwang A-component at dalawang uri-tiyak - B at C. Ayon sa kanilang presensya, ang Ogawa serovar ay may kumbinasyon ng AB, Inaba - AC, Hikojima - ABC.

Ang Vibrio cholerae ay maaaring pumasa mula sa S-to R-form, hindi na agglutinated ng O-serum. Kaugnay ng antigenic na istraktura, ang O-serum, OR-serum (upang makita ang mga OR- at R-dissociants), partikular na uri ng sera Inaba (C) at Ogawa (B) ay ginagamit upang makilala ang V. cholerae. Noong 1990s, natuklasan ang isang bagong serovar V.cholerae 0139, na hindi pinagsama-sama ng nasa itaas na sera, at sa iba pang mga katangian ay kaunti lamang ang pagkakaiba sa 01 group vibrio cholerae.

Hindi nai-type ng pangunahing 01 serum (i.e., hindi kabilang sa 01 group) vibrios ay tinatawag na non-agglutinating (NAG) vibrios - cholera-like o paracholeric. Ibinabahagi nila ang H-antigen sa Vibrio cholerae, ngunit naiiba sa O-antigen.

Ayon sa H-antigen, ang mga grupong A at B ay nakikilala, ang cholera vibrios ay kasama sa grupong A. Ang mga virion ng Group B (biochemically naiiba sa cholera) ay may heterogenous na istraktura ng O-antigen at nahahati sa anim na serological subgroup.

Vibrio cholerae pathogenicity kadahilanan.

1. Mobility(flagella) at chemotaxis.

2. Mga enzyme itaguyod ang pagdirikit at kolonisasyon, pakikipag-ugnayan sa mga epithelial cells - mucinase (thinns mucus), neumaminidase (interaksyon sa microvilli, paglikha ng isang landing pad), lecithinase at iba pa.

3. Endotoxin- thermostable lipopolysaccharide, katulad sa istraktura at mga katangian sa iba pang mga endotoxin ng gram-negative na bakterya.

4. Exotoxin - cholerogen- ang pangunahing kadahilanan ng pathogenicity, thermolabile protein. Ang synthesis ng cholerogen ay ang pinakamahalaga, genetically determined property ng cholera vibrio. Ang molekula ng cholerogen ay binubuo ng dalawang fragment A at B. Ang peptide A 1 ng fragment A ay gumaganap ng sarili nitong nakakalason na pag-andar. Kinikilala ng molekula ng cholerogen ang enterocyte receptor, tumagos sa lamad ng cell, pinapagana ang adenylate cyclase system, ang nag-iipon na cyclic AMP ay nagiging sanhi ng fluid hypersecretion , Na +, HCO 3 -, K + , Cl - mula sa mga enterocytes. Ito ay humahantong sa pagtatae na katangian ng cholera, dehydration at demineralization ng katawan.

5. Maraming vibrios, incl. hindi kabilang sa grupo 01, mayroong iba't-ibang mga enterotoxin.

6. Sa pathogenesis ng mga pagpapakita ng kolera, ang kadahilanan na nagpapataas ng pagkamatagusin ng mga capillary ay mahalaga din.

Ang ilang mga tampok ng epidemiology. Ang kolera ay isang impeksyon sa bituka. Ang pangunahing pinagmumulan ay isang tao (may sakit o vibriocarrier), maruming tubig. Ang paraan ng impeksyon ay fecal-oral. Ang indibidwal na pagkamaramdamin sa kolera ay lubhang pabagu-bago. Nailalarawan sa pamamagitan ng isang malaking bilang ng mga nakatagong (binura) na mga form, vibriocarrier. Ang pagtuklas ng isang pathogen sa tubig ay direktang nauugnay sa pagkakaroon ng mga pasyente o mga carrier ng bakterya. Ang Vibrio cholerae ng grupo 01 ay maaaring manatili sa aquatic ecosystem sa mahabang panahon sa anyo mga hindi nilinang na anyo.

Mga diagnostic sa laboratoryo. Ang kolera ay kabilang sa pangkat ng mga partikular na mapanganib na impeksyon, ang paglilinang ng pathogen nito ay nangangailangan ng pagsunod sa isang espesyal na rehimeng kaligtasan ng biyolohikal. Ang pangunahing paraan ng diagnostic ay bacteriological, kabilang dito ang paghihiwalay at pagkilala sa pathogen.

Materyal para sa pag-aaral - mga dumi at suka, mga materyal na seksyon mula sa mga patay, mga sample ng tubig at mga paghuhugas mula sa mga bagay sa kapaligiran, mga nalalabi sa pagkain.

Para sa inoculation, ginagamit ang liquid enrichment media, alkaline MPA, elective at differential diagnostic media (mas maganda ang TCBS). Ang pinaka-angkop na daluyan ng transportasyon ay 1% na tubig ng peptone. Ang mga kahina-hinalang vitreous transparent colonies ay subcultured upang makakuha ng purong kultura, na kinilala sa pamamagitan ng morphological, cultural, biochemical properties, mobility, antigenic properties, at phagotyped.

Para sa pinabilis na diagnosis, ang immunoluminescent na paraan, biochemical identification na may isang hanay ng mga indicator disk ay ginagamit, para sa pagtuklas ng V. cholerae sa mga pangunahing materyales - RNHA na may isang antibody diagnosticum, para sa pagtuklas ng mga non-culturable form - PCR, para sa pagpapasiya ng virulence at synthesis ng cholerogen - bioassays sa rabbits - suckers, ELISA, DNA - probes (detection ng isang chromosome fragment na nagdadala ng cholerogen operon).

tiyak na prophylaxis. Mayroong iba't ibang mga bakuna - sina Inaba at Ogawa na pinatay mula sa mga serovar, cholerogen toxoid, chemical bivalent vaccine. Ang mga bakuna ay ginagamit lamang ayon sa epidemiological indications (low immunogenicity). Maaaring isagawa ang antibiotic prophylaxis (preventive therapy) na may tetracycline at iba pang antibiotic.

V. parahaemolyticus Ang (parahemolytic vibrio) ay isang halophile, na matatagpuan sa tubig dagat (Japanese, Black, Caspian at iba pang dagat sa timog). Kapag gumagamit ng mga produktong dagat na hindi napapailalim sa sapat na paggamot sa init, ang pathogen na ito ay nagiging sanhi ng pagkalason sa pagkain at dysentery sa mga tao - mga katulad na sakit. Nagdudulot ng hemolysis sa blood agar na may mas mataas na konsentrasyon ng sodium chloride (7% NaCl - mga strain na may enteropathogenic properties).

V. vulnificus- ang pinaka pathogenic species para sa mga tao ng non-cholera vibrios. Ang mga ito ay matatagpuan sa tubig ng dagat at sa mga naninirahan dito. Nagdudulot ng impeksyon sa sugat, septicemia at iba pang sakit. Nag-ferment ito ng sucrose at lactose, bumubuo ng mga dilaw na kolonya sa TCBS agar.

Mga kinatawan ng genera na Campylobacter at Helicobacter.

Ang mga gram-negative na microaerophile ng dalawang genera na ito ay maliit, motile, hindi bumubuo ng spore, kurbadong (hugis-S o parang gull-wing) na bakterya na hugis-baras. Ang mga species na bumubuo sa genus Helicobacter, kabilang ang H.pylori, ang causative agent ng human peptic ulcer, ay nakahiwalay sa genus Campylobacter.

Genus Campylobacter

Kasama sa genus na ito ang 13 species ng spiral bacteria na may isa o higit pang whorls. Ang Campylobacter ay mga motile microorganism na may polar flagella (o flagellum) at helical na paggalaw. Hindi sila nag-ferment o nag-oxidize ng carbohydrates, caprophiles at microaerophiles, i.e. nangangailangan ng mas mataas na konsentrasyon ng CO 2 at isang pinababang konsentrasyon ng O 2 .

Kasama sa genus ang mga species na pathogenic sa mga tao at mga hayop na mainit ang dugo. Ang mga sakit na dulot nila - campylobacterioses - talamak na sakit sa bituka na nangyayari na may pinsala sa gastrointestinal tract. Ang Campylobacter ay madalas na nakahiwalay sa mga bituka, bibig, at genitourinary organ ng mga hayop na mainit ang dugo.

Maglaan ng grupo ng C.jejuni (kabilang ang species na ito, pati na rin ang C.coli, C.lari) o thermophilic campylobacter. Ang mga ito ay nakikilala sa pamamagitan ng isang mataas na temperatura na pinakamabuting kalagayan para sa paglago (+42 0 C).

Kabilang sa mesophilic campylobacter bacteria na may pinakamainam na paglago sa +37 0 C, ang C.fetus ay may malaking papel sa patolohiya ng tao (nagdudulot ng arthritis, meningitis, vasculitis, abortion), at mayroon ding ilang mga conditional pathogenic species (C.concisus at C). .sputorum - sa oral cavity, C.fennelliae, C.cinaedi at C.hyointestinalis - sa malaking bituka).

mga katangiang pangkultura. Para sa mga campylobacter, ang mga espesyal na halo ng gas ay kinakailangan upang lumikha ng mga kondisyon ng microaerophilic, pH - 7.0-7.2, mga kondisyon ng mesophilic (+42 0 C - para sa mga thermophile, +37 0 C - para sa iba pa). Gumamit ng espesyal na nutrient media (karne, atay, dugo) kasama ng mga piling antibiotic. Upang makakuha ng mas malinis na mga sample para sa mga pananim (mas madalas suriin ang mga coprofiltrate!) Maaaring gamitin ang pagsasala sa pamamagitan ng mga filter ng lamad na may diameter ng pore na 0.65 µm. Sa siksik na media, bumubuo sila ng dalawang uri ng mga kolonya - "kumakalat" na may hindi pantay na mga gilid o makintab na matambok na may pantay na mga gilid, ang mga kolonya ay maliit.

mga katangian ng biochemical. Inert sa carbohydrates, bawasan ang nitrates, oxidase - positibo, ang enerhiya ay nakuha mula sa mga amino acid at tricarboxylic acid. Ang pagkakaiba-iba ng mga species ayon sa biochemical properties ay batay sa hippurate hydrolysis(C.jejuni at C.coli), pagiging sensitibo sa nalidixic acid(C.jejuni at C.lari), ang pagbuo ng hydrogen sulfide, atbp.

Antigenic na istraktura. Ang mga Campylobacter ay mayroong O-, H- at K-antigens. Thermotable O-antigens ang pangunahing kahalagahan para sa serotyping.

mga tampok na epidemiological. Ang Campylobacter ay karaniwan sa iba't ibang uri ng mammal at ibon. Ang pangunahing ruta ng paghahatid ay pagkain. Ito ay nakararami sa tag-araw na pana-panahon.

Ang pangunahing pathogenetic na mga kadahilanan. Ang mga Campylobacter ay nailalarawan sa pamamagitan ng mataas na malagkit at nagsasalakay na aktibidad, mabilis na kolonisasyon ng mga itaas na bahagi ng maliit na bituka. Ang flagella at mga partikular na surface adhesin ay ang pinakamahalagang salik ng pagdirikit. Ang mga bacteria na ito ay may endotoxin, thermolabile enterotoxin.

Mga klinikal na pagpapakita- enterocolitis.

Mga diagnostic sa laboratoryo. Paraan ng mikroskopiko - paglamlam ng 1% na may tubig na solusyon ng pangunahing fuchsin sa loob ng 10-20 segundo - nagpapakita ng mga maikling chain na hugis-S, "mga pakpak ng gull". Ang pangunahing paraan - bacteriological - paghahasik ng mga feces. Nakikilala ang mga kultura sa pamamagitan ng kumbinasyon ng mga katangian.

Helicobacter pylori.

Ang peptic ulcer ay isang sakit na nailalarawan sa pagkakaroon ng peptic ulcer sa gastric mucosa o duodenum. Ang pagtuklas ng H.pylori ay humantong sa isang rebolusyon sa mga ideya tungkol sa etiology, pathogenesis, paggamot at pag-iwas sa peptic ulcer. Ang peptic ulcer ay halos 100% na nauugnay sa Helicobacter pylori. Ang mga kadahilanan ng stress at sikolohikal na katangian ng mga pasyente, pati na rin ang mga genetic na kadahilanan sa pag-unlad ng sakit, ay may mahalagang papel din.

Morpolohiya at kultural na katangian- katulad ng Campylobacter. Mas gusto ang chocolate agar.

mga katangian ng biochemical. Mayroon itong urease, oxidase- at catalase-positive.

mga katangian ng antigenic. Mayroon itong O- at H- antigens.

Ang pathogenesis ng mga sugat. Ang mga Helicobacter ay tumagos sa pamamagitan ng mucus layer (mas madalas sa antrum ng tiyan at duodenum), nakakabit sa mga epithelial cells, tumagos sa mga crypts at glands ng mucous membrane. Ang mga bacterial antigens (pangunahin ang LPS) ay nagpapasigla sa paglipat ng neutrophil at nagdudulot ng matinding pamamaga. Ang Helicobacter ay naisalokal sa lugar ng intercellular passages, na dahil sa chemotaxis sa urea at hemin (pagkasira ng erythrocyte hemoglobin sa microvasculature). Sa ilalim ng pagkilos ng Helicobacter urease, ang urea ay nasira sa ammonia, ang pagkilos nito ay nauugnay sa pinsala sa mauhog lamad ng tiyan at duodenum. Maraming mga enzymes (mucinase, phospholipase, atbp.) ay maaari ring pasiglahin ang mucosal integrity disorder.

Pangunahing kasama sa pathogenicity factor ng H. pylori ang colonization factors (adhesion, motility), persistence factors at disease-causing factors. Ang mga pangunahing kadahilanan sa tropismo at pathogenicity ng H. pylori ay kinabibilangan ng mga mekanismo ng pagdirikit at pagtatago ng mga bacterial toxins. Ang katibayan ng nangungunang papel ng antigen ng Lewis B bilang isang receptor para sa pagdirikit ay ipinakita. Bilang karagdagan sa kanila, ang mga gastric mucins at sulfatides ng gastric mucosa ay mahalaga. Natukoy ang Bab A na protina ng pathogen (adhesin), na nagpapahintulot sa mikroorganismo na magbigkis sa antigen ng pangkat ng dugo ng Lewis B na nasa ibabaw ng gastric epithelial cells. Ang iba pang salik ng pathogenicity ay ang cag A (cytotoxin associated gene) at vac A (vacuolizing cytotoxin). Ang mga strain na nagpapahayag ng mga virulence marker na ito ay nabibilang sa unang uri ng mga strain, na nauugnay sa isang tumaas na potensyal na ulcerogenic at nagpapasiklab, sa kaibahan sa pangalawang uri ng mga strain na walang mga salik na ito.

Ang pagkakaroon ng lahat ng tatlong mga kadahilanan (Bab A, cag A, vacA) ay mahalaga para sa pagpapakita ng mga pathogenic na katangian ng H. pylori (triplet - positive strains). Ang nakakapinsalang epekto sa mucosa ay maaaring maiugnay kapwa sa direktang pagkilos ng bacterial toxins at sa isang hindi direktang epekto sa pamamagitan ng immune system. Ang pangmatagalang pagtitiyaga ng pathogen ay nauugnay sa isang bilang ng mga mekanismo na ginagawang posible upang mapagtagumpayan ang mga proteksiyon na hadlang ng mucosa, at ang kakayahang bumuo ng mga coccal form na walang potensyal na pathogen.

Ang H. pylori ay hindi palaging humahantong sa pag-unlad ng peptic ulcer, gayunpaman, sa peptic ulcer, ang pathogen na ito ay patuloy na nakikita. Ang mga salik na tumutukoy sa ulcerogenicity ng H. pylori ay masinsinang pinag-aaralan.

Mga diagnostic sa laboratoryo dapat na komprehensibo, batay sa ilang mga pagsubok. Ang mga paraan ng pagtuklas ay maaaring invasive (kaugnay ng pangangailangang kumuha ng biopsy ng mucosa) at hindi invasive (indirect).

Ang mga pangunahing pamamaraan para sa pag-detect ng H.pylori sa mucosal biopsy specimens.

1. Mga pamamaraan ng mikroskopiko (paglamlam ng hematoxylin - eosin, acridine orange, Gram, water fuchsin, silver impregnation; phase-contrast microscopy na may pagpapasiya ng kadaliang kumilos).

2. Pagpapasiya ng aktibidad ng urease.

3. Paghihiwalay at pagkakakilanlan ng pathogen sa siksik na media (karaniwan ay dugo). Ang mga pananim ay isinasagawa sa blood agar, blood agar na may amphotericin, erythritol - agar na may amphotericin. Nilinang para sa 5-7 araw sa 37 tungkol sa C sa microaerophilic, aerobic at anaerobic na kondisyon. Ang pag-aari ay natutukoy sa pamamagitan ng morpolohiya ng mga microorganism at kanilang mga kolonya, helical mobility, paglago sa microaerophilic na kondisyon at ang kawalan ng paglaki sa aerobic at anaerobic na mga kondisyon at sa temperatura ng +25 at +42 ° C, sa pamamagitan ng pagkakaroon ng oxidase, catalase at urease aktibidad.

4. Pagkilala sa mga pathogen antigen sa ELISA.

5. Ang mga diagnostic ng PCR ay ang pinakasensitibo at partikular na pagsubok.

Kabilang sa mga di-nagsasalakay na pamamaraan - "pagsubok sa paghinga", ELISA para sa pagtuklas ng IgG at IgA - mga antibodies.

Paggamot kumplikado, sa paggamit ng mga pamamaraan ng kalinisan (erradiation ng pathogen). Ilapat ang De-NOL (colloidal bismuth subcitrate), ampicillin, Trichopolum (metronidazole), atbp.

Paunang konklusyon: ayon sa mga biochemical na katangian, ang nakahiwalay na kultura ay tumutugma sa Shigella subgroup ______________________________

4. Ilagay ang agglutination reaction sa baso ng nakahiwalay na kultura na may type-specific sera kay Shigella Flexner (1,2,3), ihambing ang mga resulta sa Table 3, magbigay ng konklusyon.

Talahanayan 3

Pag-uuri ng Shigella ayon sa antigenic na istraktura

Subgroup Serovar
A - S. dysenteriae 1-10
B- S. flexneri 1a 1b
2a 2b
3a 3b 3s
4a 4b
X
e
X
sa
C-S. boydii 1-15
D. S. sonnei -

Konklusyon: Ang Shigella flexneri ay nakahiwalay sa dumi ng pasyente;

serovar _________________________________________________________

5. Supplement ang scheme ng laboratory diagnostics ng dysentery.

sinaliksik

materyal:

Stage I Stage II

Stage III RA na may mga species, tipikal, subtype na diagnostic sera

Ilista ang mga katangian ng Shigella na kinakailangan upang matukoy ang kanilang mga species, uri at subtype: _____________________________________________________________________

____________________________________________________________________________________

6. Ilista ang pathogenicity factors ng shigella: __________________________
________________________________________________________________________________________________________________________________________________

III. Suriin ang mga diagnostic na paghahanda (diagnostic immune sera, diagnosticums, antigens)

CRS: Helicobacteria, mga katangian, mga kadahilanan ng pathogenicity. Diagnosis ng laboratoryo ng helicobacteriosis.
1. Taxonomic na posisyon ng bakterya ng genus Helicobacter.
2. Mga tampok ng morpolohiya, kultura at biochemical na katangian ng helicobacteria.
3. H. pylori pathogenicity kadahilanan.
4. Ang pathogenesis ng mga sugat ng gastric mucosa at duodenum na dulot ng Helicobacter pylori. Ang papel na ginagampanan ng H. pylori sa pathogenesis ng gastric at duodenal ulcers
5. Mga pamamaraan ng diagnostic ng laboratoryo ng helicobacteriosis.
Mga abstract na paksa:

Lagda ng guro ____________________


Petsa ng__________________

Aralin 4

Paksa: Salmonella typhoid, paratyphoid at gastroenteritis. Diagnosis sa laboratoryo ng salmonellosis.

Mga isyu para sa talakayan:

1. Pag-uuri ng salmonella. Mga pangunahing tampok sa pagkilala sa Salmonella.

2. Mga salik ng pathogenicity ng salmonella typhoid fever at pathogenesis ng sakit.

3. Mga yugto ng pagsusuri sa laboratoryo ng typhoid fever sa dynamics ng sakit.

4. Mga kadahilanan ng pathogenicity ng Salmonella - causative agents ng gastroenteritis.

5. Laboratory diagnosis ng salmonella gastroenteritis.

6. Pag-iwas sa typhoid, paratyphoid at salmonella gastroenteritis.

Mga praktikal na gawain:

I. Bacteriological na pagsusuri ng dugo ng pasyente.

1. Pag-aralan ang resulta ng paglilinang ng mga kultura ng dugo sa 10% na sabaw ng apdo, tandaan ang mga pagbabago sa daluyan.


3. Tukuyin ang mga katangian ng enzymatic ng nakahiwalay na kultura ng dugo sa daluyan ng Olkenitsky, magbigay ng paunang konklusyon.



4. Pag-aralan ang mga biochemical na katangian ng Salmonella sa Hiss media (pagpapakita) at ihambing ang mga ito sa mga datos na ipinakita sa Talahanayan 1.

  • Sergei Savenkov

    ilang uri ng "kaunti" na pagsusuri ... na parang nagmamadali sa isang lugar