A Shigella nemzetség több mint 40 szerotípust foglal magában. Rövid, mozdulatlan Gram-negatív rudak, amelyek nem képeznek spórákat vagy kapszulákat, jól növekednek a közönséges táptalajokon, és nem nőnek olyan éheztetési táptalajokon, amelyekben az egyetlen szénforrás a citrát vagy malonát; nem képeznek H2S-t, nem tartalmaznak ureázt; Voges-Proskauer reakciója negatív; a glükózt és néhány más szénhidrátot savképződéssel fermentálják gáz nélkül (kivéve a Shigella flexneri egyes biotípusait: S. manchester és S. newcastle); Általában nem fermentálnak laktózt (a Shigella Sonne kivételével), adonitot, szalicint és inozitot, nem cseppfolyósítják a zselatint, általában katalázt képeznek, és nem tartalmaznak lizin-dekarboxilázt és fenilalanin-deaminázt. A DNS G + C tartalma 49-53 mol%. A Shigella fakultatív anaerob, a növekedés optimális hőmérséklete 37 ° C, nem nőnek 45 ° C feletti hőmérsékleten, a környezet optimális pH-ja 6,7-7,2. A sűrű táptalajokon a telepek kerekek, domborúak, áttetszőek, disszociáció esetén durva R alakú telepek képződnek. Növekedés MPB-n egyenletes zavarosság formájában, a durva formák üledéket képeznek. A Shigella Sonne frissen izolált tenyészetei általában kétféle kolóniát képeznek: kicsi, kerek konvex (I. fázis), nagy lapos (II. fázis). A telep jellege a 120 MD molekulatömegű plazmid jelenlététől (I. fázis) vagy hiányától (II. fázis) függ, amely a Shigella Sonne virulenciáját is meghatározza.

A Shigella nemzetközi osztályozása biokémiai tulajdonságaikon (mannit nem erjedő, mannitos erjesztő, lassan laktóz erjesztő Shigella) és az antigén szerkezet jellemzői alapján történik.

A Shigella O-antigénjei eltérő specifitásúak: az Enterobacteriaceae családban közösek, generikusak, faj-, csoport- és típusspecifikusak, valamint K-antigének; Nem rendelkeznek N-antigénekkel.

Az osztályozás csak a csoport- és típusspecifikus O-antigéneket veszi figyelembe. E jellemzőkkel összhangban a Shigella nemzetség 4 alcsoportra vagy 4 fajra oszlik, és 44 szerotípust foglal magában. Az A alcsoportba (Shigella dysenteriae fajok) tartoznak a mannitot nem fermentáló Shigella fajok. A faj 12 szerotípust tartalmaz (1-12). Minden szerotípusnak megvan a maga specifikus típusú antigénje; A szerotípusok közötti antigén kapcsolatok, valamint más Shigella fajok között gyengén expresszálódnak. A B alcsoportba (Shigella flexneri faj) tartozik a Shigella, amely általában mannitot erjeszt. Ennek a fajnak a shigellái szerológiailag rokonok egymással: típusspecifikus antigéneket (I-VI) tartalmaznak, amelyek szerint szerotípusokra (1-6/" és csoportantigénekre) oszthatók, amelyek szerotípusonként eltérő összetételben találhatók meg. és aszerint, hogy a szerotípusok alszerotípusokra oszthatók.Ezen kívül ez a faj két antigénváltozatot is tartalmaz - X és Y, amelyek nem rendelkeznek tipikus antigénekkel, csoportos antigénkészletekben különböznek.Az S.flexneri 6 szerotípusnak nincs alszerotípusa, de 3 biokémiai típusra oszlik a glükóz, mannit és dulcitol fermentációjának jellemzői szerint.

A Shigella Flexner összes lipopoliszacharid antigénje a 3-as, 4-es csoportantigént tartalmazza fő elsődleges szerkezetként, szintézisét a his-lókusz közelében lokalizált kromoszómális gén szabályozza. Az I., II., IV., V. típusspecifikus antigének és a 6., 7., 8. csoportantigének a 3., 4. antigének módosításának (glikoziláció vagy acetilezés) eredménye, és a megfelelő konvertáló profágok génjei, az integráció helye határozzák meg. amelyből a Shigella kromoszóma lac-pro régiójában található.

A 80-as években jelent meg az országban. XX század és a széles körben elterjedt új S.flexneri 4 (IV:7, 8) alszerotípus eltér a 4a (IV;3,4) és 4b (IV:3, 4, 6) alszerotípustól, az S.flexneri Y változatból (IV: 3, 4) a IV. és 7., 8. konvertáló profágok lizogenizálása miatt.

A C alcsoportba (Shigella boydix fajok) tartozik a Shigella, amely általában mannitot fermentál. A csoport tagjai szerológiailag különböznek egymástól. A fajon belüli antigén kapcsolatok gyengén kifejeződnek. A faj 18 szerotípust (1-18) tartalmaz, amelyek mindegyikének megvan a maga fő típusú antigénje.

A D alcsoportba (Shigella szonettfajták) tartozik a Shigella, amely általában mannitot erjeszt, és képes lassan (24 órás inkubáció után és később) a laktóz és szacharóz fermentálására. Az 5. sonnei faj egy szerotípust tartalmaz, de az I. és II. fázisú kolóniák saját típusspecifikus antigénekkel rendelkeznek. A Shigella Sonne fajokon belüli osztályozására két módszert javasoltak:

14 biokémiai típusra és altípusra osztva őket maltóz, ramnóz és xilóz fermentációs képességük szerint;

fágtípusokra való felosztás a megfelelő fághalmazra való érzékenység szerint.

Ezeknek a tipizálási módszereknek főként epidemiológiai jelentősége van. Ezenkívül a Shigella Sonne és Shigella Flexner ugyanazon célból tipizálásnak vetik alá, hogy képesek legyenek specifikus kolicinek szintetizálására (kolicino-genotipizálás), valamint az ismert colicinekkel szembeni érzékenység miatt (kolicinotipizálás). A Shigella által termelt colicinek típusának meghatározására J. Abbott és R. Chenon a Shigella standard és indikátor törzseit, valamint a Shigella ismert típusú colicinekkel szembeni érzékenységét a P. Frederick referencia colicinogén törzseinek készletét javasolta. használt.

A vérhas egy fertőző betegség, amelyet a szervezet általános mérgezése, hasmenés és a vastagbél nyálkahártyájának sajátos elváltozása jellemez. Ez az egyik leggyakoribb akut bélbetegség a világon. A vérhas ősidők óta „véres hasmenés” néven ismert, de természete más volt. 1875-ben az orosz tudós F. A. Lesh egy véres hasmenésben szenvedő betegből izolálta az Entamoeba histolytica amőbát, a következő 15 évben sikerült ennek a betegségnek a függetlenségét megállapítani, amelyre az amőbiázis elnevezést megtartották.

Maga a vérhas kórokozója a biológiailag hasonló baktériumok nagy csoportja, amelyek a Shigella nemzetségben egyesülnek. Először kórokozó A. Chantemes és F. Vidal fedezte fel 1888-ban; 1891-ben A. V. Grigorjev, 1898-ban K. Shiga írta le a segítségével. kapott betegtől származó azonosított szérum kórokozója 34 vérhasban szenvedő betegnél, végül bizonyítva e baktérium etiológiai szerepét . A következő években azonban más kórokozókat is felfedeztek vérhas : 1900-ban - S. Flexner, 1915-ben - K. Sonne, 1917-ben - K. Stutzer és K. Schmitz, 1932-ben - J. Boyd, 1934-ben - D. Large, 1943-ban - A. Sax.

Shigella ellenállás

A Shigella meglehetősen nagy ellenállással rendelkezik a környezeti tényezőkkel szemben. Pamutszöveten és papíron akár 0-36 napig, szárított ürülékben - 4-5 hónapig, talajban - 3-4 hónapig, vízben - 0,5-3 hónapig, gyümölcsön és zöldségen - legfeljebb 2 hétig, tejben és tejtermékekben - több hétig; 60 C-os hőmérsékleten 15-20 perc alatt elpusztulnak. Érzékeny a klóramin oldatokra, aktív klórra és egyéb fertőtlenítőszerekre.

Patogenitási tényezők

A Shigella legfontosabb biológiai tulajdonsága, amely meghatározza patogenitását, az a képesség, hogy behatolnak a hámsejtekbe, szaporodnak bennük és halálukat okozzák. Ez a hatás keratoconjunctivális teszttel (a tengerimalac alsó szemhéja alá Shigella tenyészet (2-3 milliárd baktérium) egy hurok bejuttatása savós-gennyes keratoconjunctivitis kialakulását idézi elő), valamint sejtfertőzéssel is kimutatható. tenyészetek (citotoxikus hatás) vagy csirkeembriók (pusztulásuk), vagy intranazálisan fehér egerekben (tüdőgyulladás kialakulása). A Shigella fő patogenitási tényezői három csoportra oszthatók:

a nyálkahártya hámjával való kölcsönhatást meghatározó tényezők;

olyan tényezők, amelyek biztosítják a makroorganizmus humorális és celluláris védekező mechanizmusaival szembeni rezisztenciát és a Shigella szaporodási képességét a sejtekben;

a toxinok és mérgező termékek előállításának képessége, amelyek meghatározzák a kóros folyamat kialakulását.

Az első csoportba tartoznak az adhéziós és kolonizációs faktorok: szerepüket a pili, a külső membránfehérjék és az LPS töltik be. Az adhéziót és a kolonizációt a nyálkát elpusztító enzimek - neuraminidáz, hialuronidáz, mucináz - segítik elő. A második csoportba azok az inváziós faktorok tartoznak, amelyek elősegítik a Shigella behatolását az enterocitákba és szaporodását bennük és a makrofágokban, a citotoxikus és (vagy) enterotoxikus hatás egyidejű megnyilvánulásával. Ezeket a tulajdonságokat egy 140 MD molekulatömegű plazmid génjei (az inváziót okozó külső membránfehérjék szintézisét kódolja) és a Shigella kromoszómális génjei szabályozzák: ksr A (keratoconjunctivitist okoz), cyt (a sejtpusztulásért felelős) ), valamint más, még nem azonosított gének. A Shigella fagocitózis elleni védelmét a felszíni K-antigén, a 3,4 antigének és a lipopoliszacharid biztosítják. Ezenkívül a Shigella endotoxin lipid A immunszuppresszív hatással rendelkezik: elnyomja az immunmemória sejtek aktivitását.

A patogenitási faktorok harmadik csoportjába tartozik az endotoxin és a Shigella-ban található kétféle exotoxin - Shiga és Shiga-szerű exotoxinok (SLT-I és SLT-II), amelyek citotoxikus tulajdonságai a S. dysenteriaelben fejeződnek ki legerősebben. Shiga- és Shiga-szerű toxinok a S. dysenteriae más szerotípusaiban is megtalálhatók, ezeket a S.flexneri, S. sonnei, S. boydii, EHEC és néhány Salmonella is termeli. Ezeknek a toxinoknak a szintézisét a konvertáló fágok toxgénjei szabályozzák. Az LT típusú enterotoxinok Shigella Flexner, Sonne és Boyd esetében találhatók. LT szintézisüket plazmidgének szabályozzák. Az enterotoxin serkenti az adenilát-cikláz aktivitását, és felelős a hasmenés kialakulásáért. A Shiga toxin vagy nem irotoxin nem lép reakcióba az adenilát cikláz rendszerrel, de közvetlen citotoxikus hatása van. A Shiga és Shiga-szerű toxinok (SLT-I és SLT-II) m.m. 70 kDa, és A és B alegységből áll (az utóbbi 5 azonos kis alegységből áll). A toxinok receptora a sejtmembrán glikolipidje. A Shigella Sonne virulenciája egy 120 MD molekulatömegű plazmidtól is függ. Körülbelül 40 külső membrán polipeptid szintézisét szabályozza, ezek közül hét virulenciával kapcsolatos. Ezzel a plazmiddal rendelkező Shigella Sonne I. fázisú telepeket képez és virulens. Azok a tenyészetek, amelyek elvesztették a plazmidot, II. fázisú telepeket képeznek, és nincs virulenciája. 120-140 MD plazmidokat találtak Shigella Flexner és Boyd esetében. A Shigella lipopoliszacharid erős endotoxin.

A fertőzés utáni immunitás

Amint a majmok megfigyelései kimutatták, a vérhas után is erős és meglehetősen hosszan tartó immunitás marad fenn. Antimikrobiális antitestek, antitoxinok, a makrofágok és a T-limfociták fokozott aktivitása okozza. Jelentős szerepet játszik az IgA-k által közvetített bélnyálkahártya lokalizáció. Az immunitás azonban típusspecifikus, erős keresztimmunitás nem fordul elő.

A vérhas epidemiológiája

A fertőzés egyetlen forrása az. A természetben egyetlen állat sem szenved vérhasban. Kísérleti körülmények között a vérhas csak majmokban reprodukálható. A fertőzés módja széklet-orális. Átterjedési útvonalak: víz (a Shigella Flexner esetében túlnyomórészt), élelmiszer, különösen tej és tejtermékek (a Shigella Sonne esetében a fertőzés túlnyomó része), valamint háztartási érintkezés, különösen a S. dysenteriae faj esetében.

A vérhas epidemiológiájának sajátossága a kórokozók fajösszetételének megváltozása, valamint egyes régiókban a Sonne biotípusok és Flexner szerotípusok. Például a 30-as évek végéig. XX század A S. dysenteriae 1 az összes vérhas 30-40%-át tette ki, majd ez a szerotípus egyre ritkább és szinte eltűnt. Azonban az 1960-1980-as években. A S. dysenteriae újra megjelent a történelmi színpadon, és járványsorozatot okozott, amelyek három hiperendémiás góc kialakulásához vezettek - Közép-Amerikában, Közép-Afrikában és Dél-Ázsiában (India, Pakisztán, Banglades és más országok). A dizentériás kórokozók fajösszetételének változásának okai valószínűleg a kollektív immunitás megváltozásával és a vérhasbaktériumok tulajdonságainak változásával hozhatók összefüggésbe. Különösen a S. dysenteriae 1 visszatérése és széleskörű elterjedése, amely a vérhas hiperendémiás gócainak kialakulását okozta, összefüggésbe hozható a plazmidok megszerzésével, ami multidrog és fokozott virulenciát okozott.

A vérhas tünetei

A vérhas lappangási ideje 2-5 nap, néha egy napnál is kevesebb. A fertőző fókusz kialakulása a vastagbél leszálló részének (szigmoid és végbél) nyálkahártyájában, ahol a vérhas kórokozója behatol, ciklikus jellegű: adhézió, kolonizáció, a Shigella bejutása az enterociták citoplazmájába, azok intracelluláris. a hámsejtek szaporodása, elpusztítása és kilökődése, kórokozók felszabadulása a bél lumenébe; ezt követően kezdődik a következő ciklus - adhézió, kolonizáció stb. A ciklusok intenzitása a kórokozók koncentrációjától függ a nyálkahártya parietális rétegében. Az ismétlődő ciklusok hatására a gyulladásos fókusz megnő, a kialakuló fekélyek, összekötődve növelik a bélfal expozícióját, aminek következtében vér, nyálkahártya-csomók, polimorfonukleáris leukociták jelennek meg a székletben. A citotoxinok (SLT-I és SLT-II) sejtpusztulást, enterotoxinok – hasmenést, endotoxinok – általános mérgezést okoznak. A vérhas klinikai képét nagymértékben meghatározza, hogy a kórokozó milyen típusú exotoxint termel nagyobb mértékben, annak allergén hatásának mértéke és a szervezet immunállapota. A dizentéria patogenezisének számos kérdése azonban tisztázatlan, különösen: a vérhas lefolyásának jellemzői az első két életévben élő gyermekeknél, az akut vérhas krónikussá válásának okai, az érzékenyítés jelentősége, a mechanizmus. a bélnyálkahártya helyi immunitásának, stb. A vérhas legjellemzőbb klinikai megnyilvánulásai a hasmenés, gyakori késztetés: súlyos esetekben akár napi 50-szer vagy többször, tenezmus (fájdalmas végbélgörcs) és általános mérgezés. A széklet jellegét a vastagbél károsodásának mértéke határozza meg. A legsúlyosabb vérhas a S. dysenteriae 1, a legenyhébb a Sonne-féle vérhas.

Dizentéria laboratóriumi diagnosztikája

A fő módszer bakteriológiai. A kutatás anyaga a széklet. Kórokozó izolálási séma: Endo és Ploskirev differenciáldiagnosztikai táptalajon történő beoltás (párhuzamosan dúsító táptalajra, majd Endo és Ploskirev táptalajra oltás) izolált telepek izolálására, tiszta tenyészet előállítása, biokémiai tulajdonságainak tanulmányozása és az utóbbi figyelembevételével azonosítás polivalens és monovalens diagnosztikai agglutináló szérumok felhasználásával. A következő kereskedelmi szérumokat gyártják.

A mannitot nem erjesztő Shigella esetében:

S. dysenteriae 1 és 2 (polivalens és monovalens),

S. dysenteriae 3-7 (polivalens és monovalens),

a S. dysenteriae 8-12-hez (polivalens és monovalens).

Shigella fermentáló mannitra: tipikus S. flexneri I, II, III, IV, V, VI antigénekre, S.flexneri 3, 4, 6,7,8 antigének csoportosítására - polivalens, S. boydii 1-18 antigénekre ( polivalens és monovalens), S. sonnei antigénekre I. fázis, II. fázis, S. flexneri I-VI antigénekre + S. sonnei - polivalens.

A Shigella gyors azonosításához a következő módszer javasolt: egy gyanús telepet (laktóz-negatív Endo táptalajon) szubkultúrázunk TSI (triple sugar iron) táptalajon - tripla cukor-agaron (glükóz, laktóz, szacharóz) vassal a H2S termelés meghatározására; vagy glükózt, laktózt, szacharózt, vasat és karbamidot tartalmazó táptalajra.

Minden olyan organizmus, amely 4-6 órás inkubáció után lebontja a karbamidot, nagy valószínűséggel a Proteus nemzetség tagja, és kizárható. A H,S-t vagy ureázt termelő, vagy az ízületen savat termelő organizmus (laktózt vagy szacharózt erjeszt) kizárható, bár a H2S-termelő törzseket a Salmonella nemzetség lehetséges tagjaiként kell vizsgálni. Minden más esetben az ezeken a táptalajokon termesztett tenyészetet meg kell vizsgálni, és ha glükózt fermentál (az oszlop színe megváltozik), akkor tiszta formájában izolálni kell. Ugyanakkor üvegagglutinációs reakcióban is vizsgálható a Shigella nemzetséghez tartozó megfelelő antiszérummal. Szükség esetén más biokémiai vizsgálatokat is végeznek annak ellenőrzésére, hogy a Shigella nemzetségbe tartoznak-e, és megvizsgálják a motilitást is.

Az antigének kimutatására a vérben (beleértve a CEC részét is), a vizeletben és a székletben a következő módszerek használhatók: RPGA, RSK, koagglutinációs reakció (vizeletben és székletben), IFM, RAGA (vérszérumban). Ezek a módszerek rendkívül hatékonyak, specifikusak és alkalmasak a korai diagnózisra.

Szerológiai diagnosztikához a következők használhatók: RPHA a megfelelő eritrocita diagnosztikával, immunfluoreszcens módszer (indirekt módosítás), Coombs módszer (a hiányos antitestek titerének meghatározása). A dysenterinnel (Shigella Flexner és Sonne fehérjefrakcióinak oldata) végzett allergiateszt szintén diagnosztikus értékű. A reakciót 24 óra elteltével vesszük figyelembe, hiperémia és 10-20 mm átmérőjű infiltrátum esetén pozitívnak tekintjük.

Dizentéria kezelése

A fő figyelmet a normál víz-só anyagcsere helyreállítására, a racionális táplálkozásra, a méregtelenítésre, a racionális antibiotikum-terápiára fordítják (figyelembe véve a kórokozó antibiotikum-érzékenységét). Jó hatás érhető el egy polivalens dizentériás bakteriofág korai felhasználásával, különösen a pektinbevonatú tablettáknál, amelyek megvédik a fágot a HC1 gyomornedv hatásától; A vékonybélben a pektin feloldódik, fágok szabadulnak fel és fejtik ki hatásukat. Megelőző célokra a fágot legalább háromnaponta egyszer kell beadni (a bélben való túlélés időszaka).

A vérhas specifikus megelőzése

A vérhas elleni mesterséges immunitás megteremtésére különféle vakcinákat használtak: elölt baktériumok ellen, vegyszereket, alkoholt, de mindegyik hatástalannak bizonyult, és beszüntették. A Flexner-dizentéria elleni vakcinákat élő (mutáns, sztreptomicin-függő) Shigella Flexnerből hoztak létre; riboszómális vakcinák, de ezek sem találtak széles körben elterjedt alkalmazásra. Ezért a specifikus vérhas problémája továbbra is megoldatlan. A vérhas elleni küzdelem fő módja a vízellátás és a csatornarendszer javítása, a szigorú egészségügyi és higiéniai szabályok biztosítása az élelmiszeripari vállalkozásokban, különösen a tejiparban, a gyermekgondozási intézményekben, a nyilvános helyeken és a személyi higiénia fenntartásában.

A vérhas első kórokozóját A. V. Grigorjev fedezte fel (1891), és 1898-ban Shiga japán tudós tanulmányozta és leírta. A következő években e nemzetség további képviselőit izolálták és leírták: Flexner (1900), Sonne (1915), Stutzer-Schmitz (1917), Large-Sachs (1934).

A nemzetközi osztályozás szerint az összes vérhasat okozó baktérium egy nemzetségbe egyesül a Shiga - Shigella tiszteletére.

Morfológia. A Shigella kicsi (2-3 × 0,4-0,6 µm) lekerekített végű rudak. Az Enterobacteriaceae család többi tagjától eltérnek flagella hiányában. Nincsenek spóráik vagy kapszulák. Gram negatív.

Termesztés. A Shigella fakultatív anaerob. Igénytelen a tápközeggel szemben. MPA-n és MPB-n szaporodnak 37°C hőmérsékleten és 7,2-7,4 pH-n. Választható és differenciáldiagnosztikai közeg számukra a Ploskirev, az Endo és az EMS média. Kisméretű, áttetsző, szürkés, kerek telepek formájában nőnek, 15-2 mm nagyságúak, S-alakban. Kivételt képez a Shigella Sonne, amely gyakran disszociál, és nagy, lapos, felhős, R alakú, szaggatott szélű telepeket képez (44. ábra). Folyékony tápközegben a Shigella egyenletes zavarosságot hoz létre, az R-formák üledéket képeznek.

Enzimatikus tulajdonságok. A Shigella enzimatikus tulajdonságai kevésbé hangsúlyosak, mint az Enterobacteriaceae többi képviselőjének: gázképződés nélkül bontják le a szénhidrátokat, nem bontják le a laktózt és a szacharózt. Kivétel a Shigella Sonne, amely a 2-3. napon lebontja ezeket a szénhidrátokat.

A Shigella proteolitikus tulajdonságai nem túl hangsúlyosak - az indol és a hidrogén-szulfid képződése nem egyenletes, aludják a tejet, és nem cseppfolyósítják a zselatint.

A mannit vonatkozásában az összes Shigellát mannithasítóra és nem hasadóra osztják (37. táblázat).

Jegyzet. k - hasadás sav képződésével.

Jelenleg a Shigella Sonne négy enzimatikus típusra oszlik. A ramnóz és a xilóz lebontó képességében különböznek egymástól (38. táblázat).

Jegyzet. + hasítás; (+) hasadás 3-5 nap után; - nem változik.

Toxin képződés. A Shigella endotoxint tartalmaz. Kivételt képez a Shigella Shigi, amely az endotoxinon kívül neurotoxikus hatású exotoxint is termel.

Az antigén szerkezete és osztályozása. A Shigella szomatikus antigéneket tartalmaz, amelyek csoportos és típusú antigéneket tartalmaznak. A nemzetközi osztályozás szerint a Shigella négy csoportra oszlik, amelyeket A, B, C, D nagybetűkkel jelölnek.

A csoport S. dysenteriae: 1 - Grigorieva - Shigi; 2 - Stutzer - Schmitz; 3-7 - Nagy - Saksa és 8-10 - ideiglenes. Ennek a csoportnak a képviselői csak tipikus antigénekkel rendelkeznek, amelyeket arab számokkal jelölnek.

B csoport S. flexneri. Az ebbe a csoportba tartozó mikrobák antigénszerkezete összetettebb – tipikus római számokkal jelölt antigéneket és arab számokkal jelölt csoportantigéneket tartalmaznak. A Shigella Flexner 6 szerovariánssal rendelkezik. A Shigella Flexner 6-ot korábban S. newcastle alfajként jelölték meg.

C csoport S. boydii. Csak tipikus antigénjei vannak. Ebben a csoportban 15 szerológiai típus található.

A D csoport S. sonnei saját specifikus antigénnel rendelkezik (39. táblázat).

A mikrobiológiai vizsgálat során a válaszok jelzik az izolált tenyészet szerovariánsát és szubszerovariánsát. Például a Shigella Flexner 1a tenyészetét izoláltuk.

Ellenállás a környezeti tényezőkkel szemben. A 100°C-os hőmérséklet azonnal megöli a Shigellát. A 60°C-os hőmérséklet 20-30 perc alatt elpusztítja őket. A Shigella ellenáll az alacsony hőmérsékletnek - folyóvízben akár 3 hónapig, zöldségeken és gyümölcsökön - akár 10-15 hónapig. A napfény 2-3 óra alatt, a Shigella Shiga pedig 20 perc alatt megöli őket. Az általánosan használt koncentrációjú fertőtlenítő oldatok 20-30 perc alatt elpusztítják azokat. A Shigella A csoport a legkevésbé ellenálló a külső tényezőkkel szemben, a Shigella Sonne pedig a legellenállóbb.

Az állatok érzékenysége. Az állatok nem érzékenyek a vérhas kórokozóira, a majmok kivételével. A nyulak és fehér egerek kísérleti fertőzése miatt elrészegednek és elpusztulnak.

A fertőzés forrásai. A vérhas akut és krónikus formáiban és baktériumhordozóban szenvedő személy.

Átviteli útvonalak. Étel. Nagy jelentősége van a vízi útnak, a zöldségeknek, gyümölcsöknek, a Shigellával fertőzött különféle tárgyaknak és a legyeknek.

Patogenezis. A táplálékkal a belekbe kerülve a Shigella behatol a vastagbél nyálkahártyájának hámsejtjeibe, ahol elszaporodnak. Részben meghalnak. A baktériumok pusztulása során keletkező endotoxin érzékenyíti a nyálkahártyát, megnő az erek áteresztőképessége, az endotoxin felszívódik a vérbe, mérgezést okozva. A nyálkahártya károsodását duzzanat, nekrózis és vérzés kíséri. Ezenkívül a toxin hatással van a központi idegrendszerre, ami trofikus rendellenességekhez vezet. A vastagbél nyálkahártyájába mélyen behatoló Shigella Shiga okozta betegség különösen súlyos, súlyos hiperémiát, duzzanatot és véres hasmenést okoz. Az általuk termelt exotoxin súlyos mérgezést okoz.

A fertőző dózis nagysága fontos a betegség előfordulása szempontjából.

Immunitás. Az emberek természetes ellenállással rendelkeznek a vérhas fertőzéssel szemben. Betegség után az immunitás instabil, Sonne-dizentéria után pedig gyakorlatilag hiányzik. A Shigella dizentéria 1 (Grigorieva - Shigi) által okozott betegség esetén stabilabb antitoxikus immunitás alakul ki.

Megelőzés. Általános egészségügyi és járványellenes intézkedések: izolálás, korai diagnózis, fertőtlenítés.

Specifikus megelőzés nem talált széles körű alkalmazásra. Azok a személyek, akik kapcsolatba kerültek betegekkel, polivalens vérhas bakteriofágot kapnak.

Kezelés. Komplex, szulfonamidok antibiotikummal. Nincs speciális kezelés.

Ellenőrző kérdések

1. Nevezze meg a Shigella nemzetség képviselőit - a vérhas kórokozóit!

2. Melyik szénhidráthoz való viszony az alapja a Shigella két csoportra osztásának? Milyen Shigella-fajok tartoznak e csoportok mindegyikébe?

3. Melyek a Shigella behatolási útvonalai és a bél mely részét érinti?

4. Milyen típusú Shigella nő gyakran R-formában?

5. Mely Shigella fajoknak van típus- és csoportantigénje?

Mikrobiológiai vizsgálat

A vizsgálat célja: Shigella kimutatása és azonosítása diagnózis céljából; baktériumhordozók azonosítása; Shigella kimutatása élelmiszerekben.

Anyag a kutatáshoz

1. Székletürítés.

2. Metszeti anyag.

3. Élelmiszeripari termékek.

Alapvető kutatási módszerek

1. Mikrobiológiai.

2. Szerológiai.

A tanulmány előrehaladása

A tanulmány második napja

A magvas poharakat levesszük a termosztátról, és szabad szemmel vagy nagyítóval megvizsgáljuk. A gyanús (színtelen) telepeket 4-6 mennyiségben Russell táptalajon és manniton szűrjük ki. Az oltást ferde felületre húzva, majd agaroszlopba injektálva végezzük. A beoltott Russell táptalajt 18-24 órára termosztátba helyezzük (egyidejűleg a szelenit táptalajból a differenciál táptalajba történik az újraoltás).

A tanulmány harmadik napja

Távolítsa el a Russell-féle táptalajon készült terményeket a termosztátból. A laktózt nem bontó tenyészeteket további vizsgálatnak vetik alá: kenetet készítenek, Gram-festést és mikroszkópos vizsgálatot végeznek. Gram-negatív rudak jelenlétében az oltást Hiss táptalajra, indikátorpapírral (indol és hidrogén-szulfid kimutatására) és lakmusztejjel ellátott táplevesre végezzük. A beoltott táptalajt termosztátba helyezzük 18-24 órára.

A kutatás negyedik napja

Vegye ki a terményt a termosztátból, és vegye figyelembe az eredményt. A Shigellával kapcsolatos enzimatikus és kulturális tulajdonságaik miatt gyanús tenyészeteket (lásd a 37. táblázatot) szerológiai azonosításnak vetik alá. Ilyen kultúrák hiányában nemleges választ adnak.

Szerológiai azonosítás

Az izolált tenyészet faját, szerováltozatát és szubszerováltozatát adszorbeált szérummal határozzuk meg. Az antigénszerkezet elemzése üvegen az 1. számú keverékkel végzett agglutinációs reakcióval kezdődik. Ez a keverék Shigella Sonne, Newcastle elleni antitesteket tartalmazó szérumokat és Shigella Flexner elleni polivalens szérumot tartalmaz. Ha a keverék agglutinációs reakciója pozitív, az izolált tenyészetet külön-külön agglutináljuk a keverékben lévő minden egyes szérummal.

A Shigella Sonne és Newcastle adszorbeált szérummal végzett pozitív agglutinációs reakciója jogot ad a válaszadásra. A Shigella Flexner szerováltozatának és szubszerováltozatának megállapításához standard (I, II, III, IV, V) és csoportos (1-3, 4-6-7, 8) szérummal kiegészítő agglutinációs reakciókat kell végrehajtani. Például az izolált tenyészet pozitív reakciót adott a II. típusú szérummal és a 3., 4. csoportszérummal. Amint az a táblázatból látható, a Shigella Flexner 2. szerovariáns 1a. szubszerovariáns tenyészetét izoláltuk. Válasz: A Shigella Flexner 2a izolált.

Ha nincs agglutináció az 1. számú keverékkel, akkor agglutinációs reakciót hajtunk végre más többértékű szérummal.

Az agglutinációs reakció végrehajtásakor figyelembe kell venni a vizsgált tenyészetnek a mannithoz való viszonyát, és ennek függvényében kell használni egyik vagy másik szérumot. Így a mannitot nem lebontó tenyészeteket polivalens szérummal tesztelik Shigella dizentéria Grigoriev-Shiga és Stutzer-Schmitz (1, 2), Large-Sachs (3-7), ideiglenes típusok (8-10) ellen.

A mannitot lebontó tenyészeteket 1. számú keverékkel és polivalens szérumokkal teszteljük Boyd's Shigella ellen.

Ha az egyik ilyen szérum izolált tenyészetében agglutináció következik be, a tenyésztési tesztet a többértékű szérumban lévő mindegyik szérummal végezzük. Az egyik szérum pozitív eredménye meghatározza az izolált tenyészet szerovariánsát.

A Shigella Boyd szérum használatakor az agglutináció a területen leggyakrabban előforduló szerovariáns szérumával kezdődik. Hazánkban leggyakrabban a Shigella Boyd 4-es, 5-ös, 7-es, 9-es és 12-es szerovariánsait izolálják (lásd 44. ábra).

A fluoreszcens mikroszkópiát és a tengerimalacokon végzett biológiai vizsgálatokat a vérhasban végzett mikrobiológiai kutatások gyorsított módszereiként használják. Amikor a Shigella virulens törzseit bejuttatják a kötőhártyazsákba (az alsó szemhéj alá), az első nap végére az állatokban kötőhártya-gyulladás alakul ki.

Ellenőrző kérdések

1. Milyen anyagot használnak bakteriológiai vizsgálatra a vérhas diagnosztikájában és hogyan gyűjtik?

2. Melyik szénhidrát lebontása ad jogot nemleges válaszadásra?

3. Milyen szérumok segítségével határozható meg a Shigella Flexner faja, alfaja, szerovára és alszerovariája?

4. Milyen szérumokat tartalmaz az 1. számú keverék?

Tanulmányozza a vérhas vizsgálati diagramját napról napra.

Kulturális média

Ploskirev, Endo, EMS média(lásd a 19. fejezetet).

A cikk tartalma

Shigella

Morfológia és élettan

Antigének

Patogenitás és patogenezis

Immunitás

Ökológia és epidemiológia

Vérhas (shigellosis)

Anyagfelvétel kutatáshoz

Bakteriológiai kutatás

Szerológiai diagnózis

Specifikus megelőzés és kezelés

Escherichia nemzetség.

Az Escherichia a leggyakoribb aerob bélbaktérium, amely bizonyos körülmények között emberi betegségek széles csoportját okozhatja, mind bélrendszeri (hasmenés), mind extraintestinalis (bakterémia, húgyúti fertőzések stb.) lokalizációját. A fő faj az E. coli (Escherichia coli) - az enterobaktériumok által okozott fertőző betegségek leggyakoribb kórokozója. Ez a kórokozó a széklettel való szennyeződés indikátora, különösen a vízben. Ha - titer és if - index gyakran használták egészségügyi mutatóként. Az Escherichia az emlősök, madarak, hüllők és halak vastagbél mikroflórájának része.

Kulturális tulajdonságok. Folyékony táptalajon az E. coli diffúz zavarosságot, szilárd táptalajokon S- és R-forma telepeket képez. Az Escherichia fő tápközegén, az Endon a laktózerjesztő E. coli intenzíven vörös, fémes fényű telepeket, a nem fermentálók halványrózsaszín vagy színtelen telepeket alkotnak sötétebb középponttal, a Ploskirev táptalajon pedig vörösek, sárgás árnyalattal; Levin's médiumon sötétkékek, fémes fényűek.

Biokémiai tulajdonságok. A legtöbb esetben az E. coli szénhidrátokat (glükóz, laktóz, mannit, arabinóz, galaktóz stb.) sav- és gázképzéssel fermentál, indolt termel, de nem képez hidrogén-szulfidot, és nem cseppfolyósítja a zselatint.

Antigén szerkezet. Nem találtunk szignifikáns morfológiai különbséget a patogén és nem patogén Escherichia coli között. Megkülönböztetésük az antigén tulajdonságok vizsgálatán alapul. A felszíni antigének közül megkülönböztetünk poliszacharid O-antigéneket, flagellaris H-antigéneket és tokpoliszacharid K-antigéneket. Az O-antigéneknek több mint 170 változata ismert (ez egy bizonyos kórokozónak felel meg szerocsoport) és 57 - H-antigének (tartoznak szerovar). Rész hasmenéses(hasmenést okozó) Az Escherichia coli 43 O-csoportot és 57 OH-változatot tartalmaz.

A hasmenést okozó E. coli fő patogenitási tényezői.

1. Az adhéziós, kolonizációs és inváziós tényezők a pilusokhoz, a fimbriális struktúrákhoz és a külső membránfehérjékhez. Plazmidgének kódolják őket, és elősegítik a vékonybél alsó részének kolonizációját.

2. Exotoxinok: citotoninok (serkentik a bélsejtek folyadék-hiperszekrécióját, megzavarják a víz-só anyagcserét és elősegítik a hasmenés kialakulását) és az enterocitotoxinok (a bélfal sejtjeire és a kapilláris endotéliumára hatnak).

3. Endotoxin (lipopoliszacharid).

A különböző patogenitási tényezők jelenlététől függően a hasmenéses E. colit öt fő típusra osztják: enterotoxigén, enteroinvazív, enteropatogén, enterohemorrhagiás, enteroadhezív.

4. A patogén E. coli baktériumokra a bakteriocinek (kolicinek) termelése jellemző.

Enterotoxigén E. coli nagy molekulájú, hőre labilis toxint tartalmaznak, amely a kolerához hasonló hatású, és koleraszerű hasmenést okoz (kisgyermekeknél gyomor-bélhurut, utazók hasmenése stb.).

Enteroinvazív Escherichia coli képes behatolni és szaporodni a bélhámsejtekben. Bőséges hasmenést okoznak, amely vérrel keveredik, és nagyszámú leukocita (az invazív folyamat jelzője) a székletben. Klinikailag vérhasra hasonlít. A törzsek némi hasonlóságot mutatnak a Shigellával (stacionárius, nem fermentálnak laktózt, és magas enteroinvazív tulajdonságokkal rendelkeznek).

Enteropatogén E. coli- a gyermekek hasmenésének fő okozói. A léziók alapja a baktériumoknak a bélhámhoz való tapadása a mikrobolyhok károsodásával. Vizes hasmenés és súlyos kiszáradás jellemzi.

Enterohemorrhagiás Escherichia coli vérrel kevert hasmenést (hemorrhagiás vastagbélgyulladás), hemolitikus-urémiás szindrómát (hemolitikus anémia veseelégtelenséggel kombinálva) okozhat. Az enterohemorrhagiás Escherichia coli leggyakoribb szerotípusa az O157:H7.

Enteroadhezív E. coli nem képeznek citotoxinokat, rosszul tanulmányozták.

Járványtan. A hasmenést okozó E. coli terjedésének fő mechanizmusa a széklet-orális. A fertőzés táplálékkal, vízzel és állatok gondozása során fordulhat elő. Mivel az Escherichia számos állatfaj belében él, nehéz meghatározni a fertőzés konkrét forrását. A fertőzés érintkezési útvonala zárt létesítményekben is lehet. Az enteropatogén és enteroinvazív E. coli az escherichiosis nozokomiális kitörésének leggyakoribb oka.

Laboratóriumi diagnosztika. A fő megközelítés a tiszta tenyészet izolálása differenciáldiagnosztikai táptalajon és annak antigén tulajdonságokkal történő azonosítása. Az RA-t polivalens OK (O- és K-antigénekhez) szérumkészlettel, majd adszorbeált O-szérummal és 100 Celsius-fokra melegített tenyészetekkel helyezzük el (a K-antigének elpusztítására).

A biokémiai differenciálódás további jelentőséggel bír. A hasmenést okozó típusok azonosítása specifikus markerek azonosításával lehetséges (az enterohemorrhagiás E. coli nem fermentálja a szorbitot, és az O157:H7 szerovariáns nem mutat béta-glükuronidáz aktivitást).

Shigella nemzetség.

A Shigella az emberek és a főemlősök bélrendszeri kórokozója, amely baciláris vérhasat vagy shigellosist okoz. Az O-antigén antigén szerkezetének és biokémiai tulajdonságainak megfelelően a Shigella ismert szerotípusait négy fajra vagy szerocsoportra osztják: S.dysenteriae (A szerocsoport), S.flexneri (B szerocsoport), S.boydii (C szerocsoport) ) és S.sonnei (D szerocsoport).

Által morfológiai jellemzők A Shigella nem különbözik a többi enterobaktériumtól. Ezek nem specifikus fakultatív anaerob gram-negatív rudak.

Biokémiai tulajdonságok. A Shigella más bélbaktériumokhoz képest biokémiailag inaktív. Nem képeznek hidrogén-szulfidot a háromcukros vasagaron, és nem erjesztenek karbamidot.

A S.dysenteriae törzsei (A szerocsoport) rendelkeznek a legkisebb enzimaktivitással, csak glükózt fermentálnak gázképződés nélkül, a többi Shigellától eltérően ez a faj mannit-negatív.

A Shigella Flexner mannitot erjeszt és indolt képez, de nem erjeszti a laktózt, a dulcitot és a xilózt. A Newcastle szerotípus három biokémiai típusra oszlik. A Shigella Flexner esetében a vízi úton terjedő átvitel a jellemzőbb.

A Boyd's Shigella (C szerocsoport) hasonló biokémiai aktivitással rendelkezik, de dulcitot, xilózt és arabinózt erjeszt. Számos szerotípusuk van, amelyek mindegyikének megvan a maga fő típusú antigénje.

A Shigella Sonne (D szerocsoport) képes lassan fermentálni a laktózt és a szacharózt, biokémiai típusai és fagotípusai vannak. A fertőzés fő útja a táplálék (általában tejen és tejtermékeken keresztül).

Antigén szerkezet. A Shigella O- és K-antigénekkel rendelkezik. Az O-antigének különböző specifitású epitópjaik vannak – az enterobaktériumok családjába tartozóktól a típusspecifikusakig. Az osztályozás csak a hőstabil csoportot (négy csoport vagy típus - A, B, C és D) és típusspecifikus (szerotípusokra való felosztás) veszi figyelembe. A hőre labilis antigének közé tartoznak a K-antigének (az A és C csoportban találhatók) és a fimbriális antigének (a Shigella Flexnerben antigénikusan hasonlóak az E. colihoz). A végső azonosításhoz az antigén szerkezetének meghatározása szükséges.

Járványtan. A Shigella meglehetősen stabil a külső környezetben. A fertőzés forrása a shigellózis különböző klinikai megnyilvánulásaival rendelkező személy. A fertőzés mechanizmusa széklet-orális. A Shigella különböző típusait az uralkodó átviteli útvonalak jellemzik (kontakt-háztartás - S.dysenteriae, élelmiszer - S.sonnei, víz - S.flexneri). A járványos folyamatot a kórokozók keringő populációinak szerkezetének megváltozása jellemzi - a vezető fajok, biovariánsok, szerovariumok megváltozása, amely mind a populáció immunitásának megváltozásával, mind a kórokozó tulajdonságainak megváltozásával, különösen a kórokozó megszerzésével kapcsolatos. különböző plazmidok (R, F, Col stb.) A fertőző dózis körülbelül 200-300 Shigella. A Shigella Sonne által okozott vérhas enyhébb lefolyású.

Patogenitási tényezők és a léziók patogenezise. A Shigella fő biológiai jellemzője az, hogy képes behatolni a hámsejtekbe, szaporodni bennük és halálukat okozni. A lézió kialakulása a leszálló vastagbél (szigmabél és végbél) nyálkahártyájában ciklikus: adhézió, kolonizáció, a Shigella bejutása az enterociták citoplazmájába, a hámsejtek szaporodása, elpusztulása és kilökődése, Shigella felszabadulása a bél lumenébe, ismét adhézió stb.

Szerep adhéziós és kolonizációs tényezők pili, külső membránfehérjék, LPS, enzimek - neuraminidáz, mucináz, hialuronidáz (elpusztítja a nyálkát) által.

A Shigella számos invázió és ellenállás tényezői a Shigella kromoszómális gének és plazmidok által szabályozott védekező mechanizmusok (K-antigén, LPS stb.) működésére.

A Shigellák különbözőek toxinok. Endotoxint és Shiga-szerű citotoxinokat (SLT-1, SLT-2) tartalmaznak. A citotoxinok sejtpusztulást, az enterotoxin hasmenést, az endotoxin pedig általános mérgezést okoz. Shiga toxin megzavarja a fehérjeszintézist, a nátrium- és vízionok felszívódását, valamint a folyadék beáramlását a gyulladás helyére.

A vérhas legjellemzőbb tünete a hasmenés, tenesmus(a végbél fájdalmas görcsei) és gyakori késztetések, általános mérgezés. A széklet jellegét a vastagbél károsodásának mértéke határozza meg.

A fertőzés utáni immunitás- tartós, típusspecifikus.

Laboratóriumi diagnosztika. A fő diagnosztikai módszer bakteriológiai. Az ürüléket Endo és Ploskirev differenciáldiagnosztikai táptalajra oltjuk be, hogy izolált telepeket kapjunk. A tiszta tenyészeteket biokémiai tulajdonságaik alapján vizsgáljuk, az azonosítást RA-ban poli- és monovalens szérummal végezzük. Ha az izolált tenyészet rendelkezik a Shigella biokémiai tulajdonságaival, de nem agglutinálja a szérumot O-antigénekhez, akkor 30 percig forralni kell, hogy elpusztítsa a hőre labilis K-antigéneket, amelyek gyakran megakadályozzák a Shigella A és C szerocsoportjainak agglutinációját (pl. , amelynek K-antigénjei vannak), és ismét RA kutatás.

A szerológiai diagnózishoz RPGA-t használnak csoportos eritrocita diagnosztikával.

8. sz. előadás. A Vibrio, Campylobacter, Helicobacter nemzetségek képviselői.

Vibrio nemzetség.

A Vibrionaceae családba mozgó, ívelt, rúd alakú baktériumok tartoznak poláris flagellákkal. Evolúciósan vízi baktériumokból származnak, széles körben elterjedtek édes- és tengervízben, gerinctelen és gerinces gazdákban. Az emberre patogén fajokat nemzetségekbe sorolják Vibrio, AeromonasÉs Plesiomonas.

A Vibrio nemzetséget rövid, egyenes vagy ívelt gram-negatív rudak jellemzik, mozgékonyak, nem képeznek spórákat vagy kapszulákat, és jól növekszenek közönséges táptalajokon. Gáz nélküli savképződéssel erjesztik a szénhidrátokat, érzékenyek az O/129 vibriosztatikus szerre. Plusz 18 és 37 o C közötti hőmérsékleten termeszthető, pH 8,6-9,0.

A Vibrio nemzetség képviselőit biokémiai tesztek különböztetik meg a család többi nemzetségétől. A nemzetség több mint 25 fajt tartalmaz, amelyek közül a legfontosabb Vibrio cholerae- a kolera kórokozója, valamint a V.parahaemolyticum, V.vulnificus.

Vibrio cholerae.

Morfológia. A Vibrio cholerae egy sarki flagellummal rendelkezik, amely gyakran vesszőhöz hasonlít ( Koch vessző). Fontos diagnosztikai jel a mobilitás (mikroszkóppal meghatározva akasztós vagy zúzott csepp módszerrel). Morfológiailag változó. Jól festenek Pffeffer-féle vízfukszinnal és Ziehl-féle karbolos fukszinnal.

Kulturális tulajdonságok. Fakultatív anaerob. A Vibrio cholerae nem igényes a tápközeggel szemben. Jól szaporodik 1%-os lúgos (pH 8,6-9,0) pepton vízben, megelőzve a bélcsoportba tartozó baktériumokat (dúsító közeg), finom kékes filmet és zavarosságot képez. A Proteus és néhány más mikroorganizmus növekedésének elnyomására peptonvizet használnak kálium-tellurit hozzáadásával.

Sűrű táptalajokon a Vibrio cholerae sima, üveges, átlátszó korong alakú telepeket képez, amelyek viszkózus konzisztenciájú kékes árnyalatúak. Használjon lúgos agart, epesós agart, lúgos véragart, a legjobb a TCBS agar (tioszulfátos agar, citrát, epesó és szacharóz).

Biokémiai tulajdonságok. A Vibrio cholerae sok szénhidrátot (glükóz, szacharóz, mannóz, mannit, laktóz, levulóz, glikogén, keményítő) erjeszt, gáz nélküli savképződéssel. Három cukorral kapcsolatban ( Heiberg triásza) - szacharóz, mannóz és arabinóz, a vibriókat nyolc biokémiai csoportra osztják, a Vibrio cholerae az első csoportba tartozik (lebontja a szacharózt és a mannózt).

A Vibrio cholerae lebontja a zselatint, a kazeint, koagulálja a tejet és a fehérjekészítményeket indollá és ammóniává bontja.

A V.cholerae fajt a biotípusok, szerocsoportokÉs szerovarok.. A fő biotípusok a klasszikus (V.cholerae asiaticae) és az El Tor (V.cholerae eltor). A szerocsoportokat az O-antigének szerkezete különbözteti meg, a Vibrio cholerae fő O1 csoportjában az Ogawa, az Inaba és a Hikojima szerovariánsok különböztethetők meg.

Antigén szerkezet. Vibrio cholerae-ben hőstabil O-antigéneket és termolabilis H-antigéneket izolálnak. Az O-antigének szerkezete alapján 139 szerocsoportot azonosítottak, az El Tor és a klasszikus biotípusokat a 01-es csoportba egyesítik (01 antiszérum szerint tipizálva). Az El Tor izolátumokat hemolitikus tulajdonságok (a birka eritrociták hemolízisét okozzák), a csirke vörösvértestek agglutinációjának képessége, a polimixinnel szembeni rezisztencia és a fágokra való érzékenységük különböztetik meg.

A 01-es csoport O-antigénje heterogén, és egy közös A-komponenst és két típusspecifikusat - B-t és C-t - tartalmaz. Jelenlétük szerint az Ogawa szerovariáns az AB, Inaba - AC, Hikojima - ABC kombinációval rendelkezik.

A Vibrio cholerae átjuthat az S-formából az R-formába anélkül, hogy az O-szérum agglutinálná. Az antigén szerkezet miatt az O-szérumot, az OR-szérumot (az OR- és az R-disszociációk azonosítására), az Inaba (C) és az Ogawa (B) típusspecifikus szérumokat használják a V. cholerae azonosítására. A 90-es években egy új V.cholerae 0139 szerovariánst azonosítottak, amelyet a fenti szérumok nem agglutinálnak, és egyéb tulajdonságaiban alig tér el a Vibrio cholerae 01-es csoportjától.

A fő 01-es szérum által nem tipizált (azaz nem a 01-es csoportba tartozó) vibriókat nem agglutináló (NAG) vibrióknak nevezzük – koleraszerűnek vagy paracholerának. A Vibrio cholerae-vel közös H-antigénjük van, de az O-antigénben különböznek.

A H-antigén alapján megkülönböztetjük az A és B csoportot, a kolera vibriókat az A csoportba soroljuk. A B csoport virionjai (biokémiailag különböznek a kolera vibrióitól) heterogén O-antigén szerkezettel és hat szerológiai alcsoportra oszthatók.

A Vibrio cholerae patogenitási tényezői.

1. Mobilitás(flagella) és kemotaxis.

2. Enzimek elősegítik az adhéziót és a kolonizációt, a hámsejtekkel való interakciót - mucináz (vékony a nyálka), neutaminidáz (kölcsönhatás mikrobolyhokkal, leszállóhely létrehozása), lecitináz és mások.

3. Endotoxin- hőstabil lipopoliszacharid, szerkezetében és tulajdonságaiban hasonló a Gram-negatív baktériumok egyéb endotoxinjaihoz.

4. Exotoxin - kolerogének- a fő patogenitási faktor, egy hőlabilis fehérje. A kolerogénszintézis a Vibrio cholerae legfontosabb, genetikailag meghatározott tulajdonsága. A kolerogén molekula két A és B fragmensből áll. A tényleges toxikus funkciót az A fragmentum A1 peptidje látja el. A kolerogén molekula felismeri az enterocita receptort, behatol a sejtmembránba, aktiválja az adenilát cikláz rendszert, a felhalmozódó ciklikus AMP hiperszekréciót okoz. folyadék, Na +, HCO 3 -, K +, Cl - enterocitákból. Ez a kolerára jellemző hasmenéshez, kiszáradáshoz és a test sótalanításához vezet.

5. Sok vibrióban, pl. nem tartoznak a 01-es csoportba, különféle enterotoxinok.

6. A kolera manifesztációinak patogenezisében a kapillárisok permeabilitását növelő tényező is fontos.

Az epidemiológia néhány jellemzője. A kolera bélfertőzés. A fő forrás egy személy (beteg vagy rezgéshordozó), szennyezett víz. A fertőzés módja széklet-orális. A kolerára való egyéni fogékonyság rendkívül változó. Jellemzője a sok rejtett (kitörölt) forma, vibriocarriage. A kórokozó vízben történő kimutatása közvetlenül összefügg a betegek vagy baktériumhordozók jelenlétével. A 01. csoportba tartozó koleravibriosok hosszú ideig megmaradhatnak a vízi ökoszisztémákban műveletlen formák.

Laboratóriumi diagnosztika. A kolera a különösen veszélyes fertőzések csoportjába tartozik, kórokozójának termesztése speciális biológiai biztonsági rendszer betartását igényli. A fő diagnosztikai módszer bakteriológiai, amely magában foglalja a kórokozó izolálását és azonosítását.

Kutatási anyag - széklet és hányás, metszetanyagok halottakról, vízminták és tamponok környezeti tárgyakról, élelmiszermaradványok.

Az oltáshoz folyékony dúsító tápközeget, lúgos MPA-t, szelektív és differenciáldiagnosztikai tápközeget (lehetőleg TCBS-t) használunk. Az 1%-os pepton víz a legkényelmesebb szállítóközegként. A gyanús üvegszerű átlátszó telepeket áttenyésztjük, hogy tiszta tenyészetet kapjunk, amelyet morfológiai, tenyésztési, biokémiai tulajdonságok, mozgékonyság, antigén tulajdonságok és fagotípus alapján azonosítanak.

A gyorsított diagnosztikához az immunlumineszcens módszert, a biokémiai azonosítást indikátorkoronggal, a vibrios cholera kimutatására elsődleges anyagokban - RNGA antitestdiagnosztikával, a nem tenyészthető formák kimutatására - PCR, a virulencia meghatározására ill. koleragén szintézis - bioassays szopós nyulakon, ELISA, DNS - próbák (kolerogén operont hordozó kromoszóma fragmentum kimutatása).

Specifikus megelőzés. Különféle vakcinák léteznek – az Inaba és az Ogawa szerováltozatoktól elölt, koleragén toxoid, kémiai bivalens vakcina. A vakcinákat csak epidemiológiai indikációk esetén alkalmazzák (alacsony immunogenitás). Antibiotikus profilaxis (megelőző terápia) tetraciklinnel és más antibiotikumokkal végezhető.

V.parahaemolyticus(parahemolitikus vibrio) egy halofil, amely a tengervízben (japán, fekete, kaszpi és más déli tengerekben) található. A nem megfelelő hőkezelésnek alávetett tengeri termékek fogyasztása esetén ez a kórokozó élelmiszer eredetű megbetegedést és vérhasat - hasonló betegségeket - okoz az emberekben. Hemolízist okoz a vér agaron, megnövekedett nátrium-klorid koncentrációval (7% NaCl - enteropatogén tulajdonságú törzsek).

V. vulnificus- a nem kolera vibriók legpatogenikusabb faja az ember számára. A tengervízben és lakóiban észlelték. Sebfertőzést, vérmérgezést és egyéb betegségeket okoz. Szacharózt és laktózt fermentál, és sárga telepeket képez a TCBS agaron.

A Campylobacter és Helicobacter nemzetségek képviselői.

E két nemzetség gram-negatív mikroaerofiljei kicsi, mozgékony, nem spóraképző, ívelt (S-alakú vagy sirályszárny-szerű) rúd alakú baktériumok. A Helicobacter nemzetséget alkotó fajokat, köztük a H. pylorit, amely az emberi gyomorfekély kórokozója, a Campylobacter nemzetségből izolálják.

Campylobacter nemzetség

Ebbe a nemzetségbe 13 spirális baktériumfaj tartozik, amelyek egy vagy több fürtökkel rendelkeznek. A kampilobaktériumok mozgékony mikroorganizmusok poláris flagellákkal (vagy flagellummal) és spirális mozgással. Nem erjesztik, nem oxidálják a szénhidrátokat, kaprofilokat és mikroaerofileket, azaz. fokozott CO 2 koncentrációt és csökkent O 2 koncentrációt igényelnek.

A nemzetségbe tartoznak az emberre és a melegvérű állatokra patogén fajok. Az általuk okozott betegségek a campylobacteriosis - akut bélbetegségek, amelyek a gyomor-bél traktus károsodásával járnak. A kampilobaktériumot gyakran izolálják melegvérű állatok beléből, szájüregéből és húgyúti szerveiből.

Létezik a C.jejuni egy csoportja (ide tartozik ez a faj, valamint a C.coli, C.lari) vagy termofil kampilobaktériumok. A növekedés magas hőmérsékleti optimuma (+42 0 C) jellemzi őket.

A +37 0 C-on optimálisan szaporodó mezofil kampilobaktériumok közül a C.fetus jelentős szerepet játszik a humán patológiában (ízületi gyulladást, agyhártyagyulladást, vasculitist, abortuszt okoz), emellett számos feltételesen patogén faj is megtalálható (C.concisus és C. .sputorum - a szájüregben, C.fennelliae, C.cinaedi és C.hyointestinalis - a vastagbélben).

Kulturális tulajdonságok. A kampilobaktériumok speciális gázkeverékeket igényelnek a mikroaerofil körülmények megteremtéséhez, pH - 7,0-7,2, mezofil körülmények (+42 0 C termofilek, +37 0 C mások). Speciális tápközeget (hús, máj, vér) használnak szelektív antibiotikumok hozzáadásával. Tisztább minták tenyésztéséhez (a koprofiltrátumokat gyakran tanulmányozzák!) 0,65 µm pórusátmérőjű membránszűrőkön történő szűrés használható. Sűrű hordozón kétféle kolóniát képeznek - egyenetlen élekkel „terülő” vagy fényes, domború, sima szélű telepeket, kis telepeket.

Biokémiai tulajdonságok. A szénhidrátokkal szemben közömbösek, redukálják a nitrátokat, az oxidáz pozitív, az energiát aminosavakból és trikarbonsavakból nyerik. A fajok biokémiai tulajdonságok szerinti megkülönböztetése azon alapul hippurát hidrolízise(C.jejuni és C.coli), érzékenység nalidixsav(C.jejuni és C.lari), hidrogén-szulfid képződés stb.

Antigén szerkezet. A kampilobaktériumok O-, H- és K-antigénekkel rendelkeznek. A hőstabil O-antigének elsődleges fontosságúak a szerotipizálásban.

Epidemiológiai jellemzők. A Campylobacter különféle emlős- és madárfajokban gyakori. A fertőzés fő útja a táplálék. Túlnyomóan nyári szezonalitás a jellemző.

Fő patogenetikai tényezők. A kampilobaktériumokra jellemző a nagy adhezív és invazív aktivitás, a vékonybél felső részének gyors kolonizációja. A legfontosabb adhéziós tényezők a flagellák és a specifikus felületi adhezinek. Ezek a baktériumok endotoxinnal, egy hőre labilis enterotoxinnal rendelkeznek.

Klinikai megnyilvánulások- enterocolitis.

Laboratóriumi diagnosztika. Mikroszkópos módszerrel - 1%-os vizes bázikus fukszin oldattal festve 10-20 másodpercig - S-alakú rövid láncokat, „sirályszárnyakat” mutatnak ki. A fő módszer a bakteriológiai - székletkultúra. A kultúrákat jellemzők halmaza azonosítja.

Helicobacter pylori.

A peptikus fekély olyan betegség, amelyet a gyomornyálkahártya vagy a nyombél fekélyes hibája jellemez. A H. pylori felfedezése forradalomhoz vezetett a peptikus fekélybetegség etiológiájával, patogenezisével, kezelésével és megelőzésével kapcsolatos elképzelésekben. A peptikus fekélybetegség csaknem 100%-ban a Helicobacter pylorihoz kapcsolódik. A betegség kialakulásában a stressztényezők és a betegek pszichés jellemzői, valamint a genetikai tényezők is jelentős szerepet játszanak.

Morfológiai és kulturális tulajdonságok- hasonló a Campylobacterhez. A csokoládé agart kedveli.

Biokémiai tulajdonságok. Ureáz-, oxidáz- és kataláz-pozitív.

Antigén tulajdonságok. O- és H-antigénekkel rendelkezik.

A léziók patogenezise. A Helicobacter áthatol a nyálkarétegen (általában a gyomor és a nyombél antrumában), megtapad a hámsejteken, és behatol a nyálkahártya kriptáiba és mirigyeibe. A bakteriális antigének (elsősorban az LPS) serkentik a neutrofilek migrációját és akut gyulladást okoznak. A Helicobacterek az intercelluláris járatok területén lokalizálódnak, ami a karbamid és a hemin kemotaxisának köszönhető (az eritrocita hemoglobin elpusztulása a mikrovaszkulatúrában). A Helicobacter ureáz hatására a karbamid ammóniává bomlik, amelynek hatása a gyomor és a nyombél nyálkahártyájának károsodásához kapcsolódik. Számos enzim (mucináz, foszfolipáz stb.) szintén serkentheti a nyálkahártya integritásának megzavarását.

A H. pylori patogenitási tényezői elsősorban a kolonizációs faktorok (adhézió, motilitás), a perzisztencia faktorok és a betegséget okozó tényezők. A H. pylori tropizmusának és patogenitásának kulcstényezői közé tartoznak a bakteriális toxinok adhéziós és szekréciós mechanizmusai. Bizonyítékot nyújtottak be a Lewis B antigénnek adhéziós receptorként betöltött vezető szerepére. Rajtuk kívül fontosak a gyomornyálkahártya mucinjai és a gyomornyálkahártya szulfatidjai. A kórokozó Bab A fehérjéjét (adhezint) azonosították, amely lehetővé teszi, hogy a mikroorganizmus kötődjön a gyomorhámsejtek felszínén található Lewis B vércsoport-antigénhez. Egyéb patogenitási tényezők közé tartozik a cag A (citotoxin-asszociált gén) és a vac A (vakuoláló citotoxin). Az ezeket a virulencia markereket expresszáló törzsek az első típusú törzsek közé tartoznak, amelyek fokozott ulcerogén és gyulladásos potenciállal rendelkeznek, ellentétben a második típusú törzsekkel, amelyek nem rendelkeznek ezekkel a faktorokkal.

Mindhárom faktor (Bab A, cag A, vacA) jelenléte elengedhetetlen a H. pylori (triplet - pozitív törzsek) patogén tulajdonságainak megnyilvánulásához. A nyálkahártya-károsító hatás mind a bakteriális toxinok közvetlen, mind pedig az immunrendszeren keresztüli közvetett hatásával összefüggésbe hozható. A kórokozó hosszú távú perzisztenciája számos olyan mechanizmussal jár, amelyek lehetővé teszik a nyálkahártya védőgátjainak leküzdését és a kórokozó potenciállal nem rendelkező coccalis formák kialakulásának képességét.

A H. pylori nem mindig vezet peptikus fekély kialakulásához, de peptikus fekélyben ezt a kórokozót folyamatosan kimutatják. A H. pylori ulcerogenitását meghatározó tényezőket intenzíven vizsgálják.

Laboratóriumi diagnosztikaátfogónak kell lennie, több teszt alapján. A kimutatási módszerek lehetnek invazívak (a nyálkahártya biopsziájának szükségességével összefüggésben) és nem invazívak (közvetettek).

Alapvető módszerek H. pylori kimutatására nyálkahártya biopsziában.

1.Mikroszkópos módszerek (festés hematoxilin-eozin, akridin narancs, Gram, víz fukszin, ezüst impregnálás; fáziskontraszt mikroszkópia mobilitás meghatározásával).

2. Az ureáz aktivitás meghatározása.

3. A kórokozó izolálása és azonosítása szilárd táptalajon (általában véren). A tenyésztést véragaron, véragaron amfotericinnel, eritrit-agaron amfotericinnel végezzük. Tenyésztése 5-7 napig 37 o C-on mikroaerofil, aerob és anaerob körülmények között. A hovatartozást a mikroorganizmusok és kolóniáik morfológiája, a spirális mobilitás, a mikroaerofil körülmények közötti növekedés, valamint a növekedés hiánya aerob és anaerob körülmények között, valamint +25 és +42 o C hőmérsékleten, az oxidáz, kataláz és ureáz jelenléte határozza meg. tevékenység.

4. A kórokozó antigének kimutatása ELISA-ban.

5. A PCR diagnosztika a legérzékenyebb és legspecifikusabb teszt.

A nem invazív módszerek közé tartozik a „légzésteszt” és az ELISA az IgG és IgA antitestek kimutatására.

Kezelés komplex, higiéniai módszerekkel (kórokozó sugárzás). De-NOL (kolloid bizmut-szubcitrát), ampicillin, trichopolum (metronidazol) stb.

Előzetes következtetés: a biokémiai jellemzők alapján az izolált tenyészet a Shigella alcsoportnak felel meg ________________________________

4. Végezzen agglutinációs reakciót az izolált tenyészet üvegén Flexner-féle Shigella (1,2,3) típusspecifikus szérummal, hasonlítsa össze a kapott eredményeket a 3. táblázattal, és vonjon le következtetést.

3. táblázat

A Shigella osztályozása antigén szerkezet szerint

Következtetés: Shigella flexnerit izoláltuk a beteg székletéből;

szerovariáns _______________________________________________________________________

5. Kiegészítse a vérhas laboratóriumi diagnosztikájának sémáját.

Kutatható

anyag:

	I. szakasz II. szakasz
szakasz III						RA fajokkal, típusokkal, altípusokkal diagnosztikai szérumokkal

Sorolja fel a Shigella tulajdonságait, amelyek szükségesek a fajuk, típusuk és altípusuk meghatározásához: _______________________________________________________________________________

____________________________________________________________________________________

6. Sorolja fel a Shigella patogenitási tényezőit: __________________________
________________________________________________________________________________________________________________________________________________

III. Vizsgálati diagnosztikai készítmények (diagnosztikai immunszérumok, diagnosztikai anyagok, antigének)

A tanár aláírása ___________________________________

Időpontja__________________

4. lecke

Tantárgy: Salmonella tífusz, paratífusz és gyomor-bélhurut. A szalmonellózis laboratóriumi diagnosztikája.

Megbeszélésre váró kérdések:

1. A szalmonella osztályozása. A szalmonella azonosításának fő jellemzői.

2. A Salmonella tífusz patogenitásának tényezői és a betegség patogenezise.

3. A tífusz laboratóriumi diagnózisának szakaszai a betegség dinamikájában.

4. A Salmonella patogenitási tényezői – a gastroenteritis kórokozói.

5. Salmonella gastroenteritis laboratóriumi diagnosztikája.

6. A tífusz, a paratífusz és a szalmonella gastroenteritis megelőzése.

Gyakorlati feladatok:

I. A beteg vérének bakteriológiai vizsgálata.

1. Tanulmányozza a vértenyészetek 10%-os epelevesben való tenyésztésének eredményét, és figyelje meg a táptalaj változásait.

3. Határozza meg az Olkenitsky-féle táptalajban izolált vértenyészet enzimatikus tulajdonságait, és vonjon le előzetes következtetést.

4. Tanulmányozza a Salmonella biokémiai tulajdonságait Hiss táptalajban (demonstráció), és hasonlítsa össze az 1. táblázatban bemutatott adatokkal.